附件：堿性磷酸酶測定試劑盒注冊技術(shù)審查指導原則（2016年修訂版）（2016年第28號）.doc

堿性磷酸酶測定試劑盒注冊
技術(shù)審查指導原則
（2016年修訂版）

本指導原則旨在指導注冊申請人對堿性磷酸酶測定試劑盒注冊申報資料的準備及撰寫，同時也為技術(shù)審評部門審評注冊申報資料提供參考。

本指導原則是對堿性磷酸酶測定試劑盒的一般要求，申請人應(yīng)依據(jù)產(chǎn)品的具體特性確定其中內(nèi)容是否適用，若不適用，需具體闡述理由及相應(yīng)的科學依據(jù)，并依據(jù)產(chǎn)品的具體特性對注冊申報資料的內(nèi)容進行充實和細化。

本指導原則是供申請人和審查人員使用的指導文件，不涉及注冊審批等行政事項，亦不作為法規(guī)強制執(zhí)行，如有能夠滿足法規(guī)要求的其他方法，也可以采用，但應(yīng)提供詳細的研究資料和驗證資料。應(yīng)在遵循相關(guān)法規(guī)的前提下使用本指導原則。

本指導原則是在現(xiàn)行法規(guī)、標準體系及當前認知水平下制定的，隨著法規(guī)、標準體系的不斷完善和科學技術(shù)的不斷發(fā)展，本指導原則相關(guān)內(nèi)容也將適時進行調(diào)整。

一、適用范圍

堿性磷酸酶測定試劑盒是指基于分光光度法原理對人血清、血漿或其他體液中的堿性磷酸酶活性進行體外定量測定的試劑。本指導原則適用于進行產(chǎn)品注冊和相關(guān)許可事項變更的產(chǎn)品。

堿性磷酸酶活性的測定方法目前主要有連續(xù)監(jiān)測法和比色法兩類：

1.連續(xù)監(jiān)測法（磷酸對硝基苯酚底物法）

堿性磷酸酶催化水解磷酸對硝基苯酚（4-NPP），生成對硝基苯酚（4-NP），在特定波長處監(jiān)測吸光度變化速率，可計算堿性磷酸酶活性。

2.比色法（磷酸苯二鈉底物法）

堿性磷酸酶催化水解磷酸苯二鈉，生成游離酚，酚與4-氨基安替比林結(jié)合，經(jīng)鐵氰化鉀氧化生成紅色的醌衍生物，在特定波長處監(jiān)測吸光度值，可計算堿性磷酸酶活性。

從方法學考慮，本文主要指以堿性磷酸酶水解底物引起特定產(chǎn)物的吸光度的改變對堿性磷酸酶活性進行定量測定的體外診斷試劑，不包括干化學和酶聯(lián)免疫檢測試劑。

依據(jù)《體外診斷試劑注冊管理辦法》（國家食品藥品監(jiān)督管理總局令第5號）、《食品藥品監(jiān)管總局關(guān)于印發(fā)體外診斷試劑分類子目錄的通知》（食藥監(jiān)械管〔2013〕242號），堿性磷酸酶檢測試劑屬于酶類檢測試劑，管理類別為Ⅱ類，分類代號為6840。

二、注冊申報資料要求

（一）綜述資料

綜述資料主要包括產(chǎn)品預(yù)期用途、產(chǎn)品描述、方法學特征、生物安全性評價、研究結(jié)果總結(jié)以及同類產(chǎn)品上市情況介紹等內(nèi)容，應(yīng)符合《體外診斷試劑注冊管理辦法》和《關(guān)于公布體外診斷試劑注冊申報資料要求和批準證明文件格式的公告》（國家食品藥品監(jiān)督管理總局公告2014年第44號）的相關(guān)要求。相關(guān)描述應(yīng)至少包含如下內(nèi)容：

1.產(chǎn)品預(yù)期用途：描述產(chǎn)品的預(yù)期用途，與預(yù)期用途相關(guān)的臨床適應(yīng)癥背景情況，如臨床適應(yīng)癥的發(fā)生率、易感人群等，相關(guān)的臨床或?qū)嶒炇以\斷方法等。

2.產(chǎn)品描述：包括產(chǎn)品所采用的技術(shù)原理，主要原材料的來源及制備方法，主要生產(chǎn)工藝過程及關(guān)鍵控制點，校準品、質(zhì)控品的制備方法以及校準品溯源和質(zhì)控品定值情況。

3.有關(guān)生物安全性方面的說明：由于體外診斷試劑中的主要原材料可能是由各種動物、病原體、人源的組織和體液等生物材料經(jīng)處理或添加某些物質(zhì)制備而成，為保證產(chǎn)品在運輸、使用過程中對使用者和環(huán)境的安全，研究者應(yīng)提供對上述原材料所采用的滅活等試驗方法予以說明，并提供相關(guān)的證明文件。

4.有關(guān)產(chǎn)品主要研究結(jié)果的總結(jié)和評價。

5.其他：包括同類產(chǎn)品在國內(nèi)外批準上市的情況。相關(guān)產(chǎn)品所采用的技術(shù)方法及臨床應(yīng)用情況，申請注冊產(chǎn)品與國內(nèi)外同類產(chǎn)品的異同等。

（二）主要原材料的研究資料（如需提供）

主要原材料的選擇、制備、質(zhì)量標準確定的方法及研究資料；校準品應(yīng)提供詳細的量值溯源資料，包括定值試驗資料和溯源性文件等；質(zhì)控品應(yīng)提供詳細的定值資料。

（三）主要生產(chǎn)工藝和反應(yīng)體系的研究資料（如需提供）

應(yīng)包含產(chǎn)品的工藝流程圖和關(guān)鍵控制點、確定反應(yīng)溫度、時間、緩沖體系比較等條件的研究資料、確定樣本和試劑盒組分加樣量、反應(yīng)條件、校準方法、質(zhì)控方法的研究資料。

ALP緩沖液通常分為三類：1.惰性型：如碳酸鹽緩沖液和巴比妥緩沖液；2.抑制型：如甘氨酸緩沖液；3.激活型：如AMP、Tris和DEA緩沖液。激活型緩沖液，緩沖物質(zhì)作為酶的一種底物（磷酸?；氖荏w），參與磷酸?；囊茡Q反應(yīng)，因此能促進酶促反應(yīng)速率。使用最適濃度和激活型緩沖液時，所測的ALP活性要比使用惰性型緩沖液（如碳酸鹽緩沖液）時高2—6倍。DEA的激活作用比AMP的激活作用更強，因此，用不同緩沖液測定ALP活性時，其參考值不同。

ALP活性與血清在反應(yīng)液中所占的體積百分數(shù)有關(guān)。當血清體積分數(shù)從1/26降低到1/51時，測出的酶活性隨之增高；但低于1/51時，酶活性沒有進一步增加。

（四）分析性能評估資料

應(yīng)至少包括具體的研究方法、試驗數(shù)據(jù)、統(tǒng)計方法、研究結(jié)論等。性能評估時應(yīng)將試劑和所選用的校準品、質(zhì)控品作為一個整體進行評價，評估整個系統(tǒng)的性能是否符合要求。

性能評估應(yīng)至少包括準確度、精密度、線性范圍、最低檢測限、分析特異性（抗干擾能力）、其他影響檢測的因素等。

1.準確度

可采用相對偏差和方法學比對之一測定試劑盒的準確度，優(yōu)先采用相對偏差的方法。

1.1相對偏差

使用申報試劑盒檢測有證參考物質(zhì)（CRM）計算相對偏差。

也可用由參考測量程序定制的參考區(qū)間上限和參考區(qū)間上限2至5倍濃度水平各一個人源樣本（可適當添加被測物，以獲得高濃度的樣本），按照上述方法對試劑盒準確度進行測試。

1.2方法學比對

采用參考方法或國內(nèi)/國際普遍認為質(zhì)量較好的已上市同類試劑作為參比方法，與擬申報試劑同時檢測一批病人樣品（至少40例樣本），從測定結(jié)果間的差異了解擬申報試劑與參比方法間的偏倚。如偏倚很小或在允許的誤差范圍內(nèi)，說明兩檢測系統(tǒng)對病人標本測定結(jié)果基本相符，對同一份臨床樣本的醫(yī)學解釋，擬申報試劑與參比方法相比不會產(chǎn)生差異結(jié)果。

在實施方法學比對前，應(yīng)分別對擬申報試劑和參比試劑進行初步評估，只有在確認兩者都分別符合各自相關(guān)的質(zhì)量標準后方可進行比對試驗。方法學比對時應(yīng)注意質(zhì)量控制、樣本類型、濃度分布范圍并對結(jié)果進行合理的統(tǒng)計學分析。其中，樣本濃度應(yīng)在方法的線性范圍內(nèi)，并覆蓋醫(yī)學決定水平。

2.精密度

測量精密度的評估建議包括兩個濃度水平的樣本進行，兩個濃度都應(yīng)在試劑盒的測量范圍內(nèi)且有一定的臨床意義，通常選用該檢測指標的臨界值附近樣本和異常高值樣本。

3.線性范圍

建立試劑線性范圍所用的樣本基質(zhì)應(yīng)盡可能與臨床實際檢測的樣本相似，理想的樣本為分析物濃度接近預(yù)期測定上限的混合人血清，且應(yīng)充分考慮多倍稀釋對樣本基質(zhì)的影響。

超出線性范圍的樣本如需稀釋后測定，應(yīng)作相關(guān)研究，明確稀釋液類型及最大可稀釋倍數(shù)，研究過程應(yīng)注意基質(zhì)效應(yīng)影響，必要時應(yīng)提供基質(zhì)效應(yīng)研究有關(guān)的資料。

4.最低檢測限

最低檢測限的確定常使用同批號試劑對零濃度校準品（或樣品稀釋液）進行至少20次重復(fù)檢測，平均值加2倍SD（≥95%置信區(qū)間）即試劑的最低檢測限。

5.分析特異性

應(yīng)明確已知干擾因素對測定結(jié)果的影響：可采用回收實驗對不同濃度的溶血（血紅蛋白）、黃疸（膽紅素）、脂血（甘油三酯）對檢測結(jié)果的影響進行評價，干擾物濃度的分布應(yīng)覆蓋人體生理及病理狀態(tài)下可能出現(xiàn)的物質(zhì)濃度。待評價的堿性磷酸酶樣本濃度至少應(yīng)為高、中、低三個水平，選取線性范圍內(nèi)有臨床代表性意義的濃度。

藥物干擾的研究可根據(jù)需要由申請人選擇是否進行或選擇何種藥物及其濃度進行。

6.校準品溯源及質(zhì)控品賦值

校準品應(yīng)提供詳細的量值溯源資料，包括定值試驗資料和溯源性文件等；質(zhì)控品應(yīng)提供詳細的定值記錄。應(yīng)參照GB/T 21415-2008《體外診斷醫(yī)療器械生物樣品中量的測量校準品和控制物質(zhì)賦值的計量學溯源性》的要求，提供企業(yè)（工作）校準品及試劑盒配套校準品定值及不確定度計算記錄，提供質(zhì)控品賦值及其靶值范圍確定的記錄。

7.其他需注意問題

不同適用機型、不同包裝規(guī)格，應(yīng)分別提交分析性能評估報告；適用機型必須明確具體型號，不能寫系列；如不同包裝規(guī)格之間不存在性能差異，需要提交包裝規(guī)格之間不存在性能差異的詳細說明，具體說明不同包裝規(guī)格之間的差別及可能產(chǎn)生的影響。

（五）參考區(qū)間確定資料

應(yīng)明確研究采用的樣本來源、詳細的試驗資料、統(tǒng)計方法等，參考值范圍可參考文獻資料，但應(yīng)當進行驗證。驗證樣本數(shù)量應(yīng)不低于120例。不同性別和年齡段，堿性磷酸酶參考范圍差異較大，申請人應(yīng)分別進行研究，驗證樣本例數(shù)應(yīng)分別達到上述要求。研究結(jié)論應(yīng)與產(chǎn)品說明書【參考區(qū)間】的相應(yīng)描述保持一致。

（六）穩(wěn)定性研究資料

穩(wěn)定性研究資料主要涉及兩部分內(nèi)容，申報試劑的穩(wěn)定性和適用樣本的穩(wěn)定性研究。

試劑的穩(wěn)定性包括實時穩(wěn)定性、運輸穩(wěn)定性、開瓶（待機）穩(wěn)定性等，申請人應(yīng)至少提供3個生產(chǎn)批次的實時穩(wěn)定性、開瓶穩(wěn)定性和運輸穩(wěn)定性研究資料，包括研究目的、材料和方法、研究結(jié)論等，研究應(yīng)涵蓋產(chǎn)品的主要性能指標，申請人應(yīng)至少能提供穩(wěn)定性末期的除裝量和批間差外的評價資料。試劑的穩(wěn)定性研究應(yīng)注意選取代表性包裝規(guī)格進行研究（例如：校準品穩(wěn)定性應(yīng)選取最易受影響的最小裝量），實時穩(wěn)定性研究的時間間隔應(yīng)不大于3個月。

適用樣本的穩(wěn)定性主要包括室溫保存、冷藏和冷凍條件下的有效期驗證，可以在合理的溫度范圍內(nèi)選擇溫度點（溫度范圍），每間隔一定時間段即對儲存樣本進行性能分析驗證，從而確認不同類型樣本的效期穩(wěn)定性。適于冷凍保存的樣本還應(yīng)對凍融次數(shù)進行評價。

試劑穩(wěn)定性和樣本穩(wěn)定性兩部分內(nèi)容的研究結(jié)果均應(yīng)在說明書【儲存條件及有效期】和【樣本要求】兩項中進行詳細說明。

（七）臨床試驗資料

臨床試驗資料應(yīng)符合《關(guān)于發(fā)布體外診斷試劑臨床試驗技術(shù)指導原則的通告》（國家食品藥品監(jiān)督管理總局通告2014年第16號）要求，同時研究資料的形式應(yīng)符合《體外診斷試劑注冊管理辦法》和《關(guān)于公布體外診斷試劑注冊申報資料要求和批準證明文件格式的公告》（國家食品藥品監(jiān)督管理總局公告2014年第44號）臨床研究資料有關(guān)的規(guī)定。下面僅對臨床試驗中的基本問題進行闡述。

1.研究方法

選擇境內(nèi)已批準上市的性能不低于試驗用體外診斷試劑的同類產(chǎn)品作為參比試劑，采用試驗用體外診斷試劑（以下稱待評試劑）與之進行對比試驗研究，證明本品與已上市產(chǎn)品等效。

2.臨床試驗機構(gòu)的選擇

應(yīng)選擇至少兩家經(jīng)國家食品藥品監(jiān)督管理總局資質(zhì)認可的臨床試驗機構(gòu)，臨床試驗工作人員應(yīng)有足夠的時間熟悉檢測系統(tǒng)的各環(huán)節(jié)（試劑、質(zhì)控及操作程序等），熟悉評價方案。在整個實驗中，待評試劑和參比試劑都應(yīng)處于有效的質(zhì)量控制下，最大限度保證試驗數(shù)據(jù)的準確性及可重復(fù)性。

3.臨床試驗方案

臨床試驗實施前，研究人員應(yīng)從流行病學、統(tǒng)計學、臨床醫(yī)學、檢驗醫(yī)學等多方面考慮，設(shè)計科學合理的臨床研究方案。各臨床試驗機構(gòu)的方案設(shè)置應(yīng)保持一致，且保證在整個臨床試驗過程中遵循預(yù)定的方案實施，不可隨意改動。整個試驗過程應(yīng)在臨床試驗機構(gòu)的實驗室內(nèi)并由本實驗室的技術(shù)人員操作完成，申報單位的技術(shù)人員除進行必要的技術(shù)指導外，不得隨意干涉實驗進程，尤其是數(shù)據(jù)收集過程。

試驗方案中應(yīng)確定嚴格的病例納入/排除標準，任何已經(jīng)入選的病例再被排除出臨床研究都應(yīng)記錄在案并明確說明原因。在試驗操作過程中和判定試驗結(jié)果時應(yīng)采用盲法以保證試驗結(jié)果的客觀性。各研究單位選用的參比試劑應(yīng)保持一致，以便進行合理的統(tǒng)計學分析。另外，待評試劑的樣本類型應(yīng)不超越參比試劑的樣本類型。

臨床試驗方案必須獲得臨床試驗機構(gòu)倫理委員會的同意。

4.研究對象選擇

臨床試驗應(yīng)選擇具有特定癥狀/體征人群作為研究對象。企業(yè)在建立病例納入標準時，應(yīng)考慮到不同人群的差異，盡量覆蓋各類適用人群。在進行結(jié)果統(tǒng)計分析時，建議對各類人群分別進行數(shù)據(jù)統(tǒng)計分析?？傮w樣本數(shù)不少于200例，異常值樣本數(shù)不少于80例。

如果待評試劑聲稱同時適用于多個樣本類型，應(yīng)完成一個樣本類型不少于200例的臨床研究，其余樣本類型的研究可選100例樣本，異常值樣本不少于40例進行臨床研究，其中不同濃度樣本分布情況與總例數(shù)中分布情況應(yīng)一致。也可以分別對同時適用的多個樣本類型按照《體外診斷試劑臨床試驗技術(shù)指導原則》中試驗樣本量一般要求規(guī)定的200例進行試驗，異常值參照上述規(guī)定。

涉及產(chǎn)品檢測條件優(yōu)化、增加與原樣本類型具有可比性的其他樣本類型等變更事項，臨床試驗采用變更后產(chǎn)品與變更前產(chǎn)品或者已上市同類產(chǎn)品進行比對試驗，在至少2家（含2家）臨床試驗機構(gòu)開展臨床試驗，總樣本數(shù)不少于100例，異常值樣本數(shù)不少于40例。

樣本應(yīng)明確存貯條件、可否凍融等要求及避免使用的樣本，血漿樣本應(yīng)明確抗凝劑的要求。實驗中，盡可能使用新鮮樣本，避免貯存。如無法避免使用貯存樣品時，注明貯存條件及時間，在數(shù)據(jù)分析時應(yīng)考慮其影響。

樣本中待測物濃度應(yīng)覆蓋待評試劑線性范圍，且盡可能均勻分布。

5.統(tǒng)計學分析

對臨床試驗結(jié)果的統(tǒng)計應(yīng)選擇合適的統(tǒng)計方法，如相關(guān)分析、線性回歸、絕對偏倚/偏差及相對偏倚/偏差分析等。對于對比實驗的等效性研究，最常用是對待評試劑和參比試劑兩組檢測結(jié)果的相關(guān)及線性回歸分析，應(yīng)重點觀察相關(guān)系數(shù)（r值）或判定系數(shù)（R2）、回歸擬合方程（斜率和y軸截距）等指標。結(jié)合臨床試驗數(shù)據(jù)的正/偏態(tài)分布情況，建議統(tǒng)計學負責人選擇合理的統(tǒng)計學方法進行分析，統(tǒng)計分析應(yīng)可以證明兩種方法的檢測結(jié)果無明顯統(tǒng)計學差異。在臨床研究方案中應(yīng)明確統(tǒng)計檢驗假設(shè)，即評價待評試劑與參比試劑是否等效的標準。

6.臨床試驗總結(jié)報告撰寫

根據(jù)《體外診斷試劑臨床試驗技術(shù)指導原則》的要求，臨床試驗報告應(yīng)該對試驗的整體設(shè)計及各個關(guān)鍵點給予清晰、完整的闡述，應(yīng)該對整個臨床試驗實施過程、結(jié)果分析、結(jié)論等進行條理分明的描述，并應(yīng)包括必要的基礎(chǔ)數(shù)據(jù)和統(tǒng)計分析方法。建議在臨床總結(jié)報告中對以下內(nèi)容進行詳述。

（1）臨床試驗總體設(shè)計及方案描述

①臨床試驗的整體管理情況、臨床試驗機構(gòu)選擇、臨床主要研究人員簡介等基本情況介紹。

②納入/排除標準、不同人群的預(yù)期選擇例數(shù)及標準。

③樣本類型，樣本的收集、處理及保存等。

④統(tǒng)計學方法、統(tǒng)計軟件、評價統(tǒng)計結(jié)果的標準。

（2）具體的臨床試驗情況

①待評試劑和參比試劑的名稱、批號、有效期及所用機型等信息；

②對各研究單位的病例數(shù)、人群分布情況進行總合，建議以列表或圖示方式給出具體例數(shù)及百分比。

③質(zhì)量控制，試驗人員培訓、儀器日常維護、儀器校準、質(zhì)控品運行情況，對檢測精密度、質(zhì)控品回收（或測量值）、抽查結(jié)果評估。

④具體試驗過程，樣本檢測、數(shù)據(jù)收集、樣本長期保存等。

（3）統(tǒng)計學分析

①數(shù)據(jù)預(yù)處理、對異常值或離群值的處理、研究過程中是否涉及對方案的修改。

②定量值相關(guān)性和一致性分析

用回歸分析驗證兩種試劑結(jié)果的相關(guān)性，以y=a+bx和R2的形式給出回歸分析的擬合方程，其中：y是待評試劑結(jié)果，x是參比試劑結(jié)果，b是方程斜率，a是y軸截距，R2是判定系數(shù)（通常要求R2≥0.95）。

（4）討論和結(jié)論

對總體結(jié)果進行總結(jié)性描述并簡要分析試驗結(jié)果，對本次臨床研究有無特別說明，最后得出臨床試驗結(jié)論。

（八）產(chǎn)品風險分析資料

對體外診斷試劑產(chǎn)品壽命周期的各個環(huán)節(jié),從預(yù)期用途、可能的使用錯誤、與安全性有關(guān)的特征、已知和可預(yù)見的危害等方面的判定以及對患者風險的估計進行風險分析、風險評價和相應(yīng)的風險控制基礎(chǔ)上，形成風險管理報告。應(yīng)當符合相關(guān)行業(yè)標準的要求。

風險分析應(yīng)包含但不僅限于以下方面的內(nèi)容：預(yù)期用途錯誤包括：設(shè)計開始時未設(shè)定預(yù)期分析物、未作適用機型驗證、未針對特定的樣本類型驗證。性能特征失效包括：精密度失效、準確度失效、非特異性、穩(wěn)定性失效、測量范圍失效、定性/定量失效、量值溯源失效、校準失效。不正確的結(jié)果包括：配方錯誤、采購的原料未能達到設(shè)計要求的性能、原材料儲存條件不正確、使用了過期的原材料、反應(yīng)體系不正確、試劑與包裝材料不相容?？赡艿氖褂缅e誤包括：生產(chǎn)者未按照生產(chǎn)流程操作，檢驗者未按照原料、半成品、成品檢驗標準操作，裝配過程組份、標簽、說明書等漏裝或誤裝，成品儲存或運輸不當，客戶未參照產(chǎn)品說明書設(shè)置參數(shù)或使用。與安全性有關(guān)的特征包括：有毒化學試劑的化學污染、樣本的潛在生物污染、不可回收包裝或塑料的環(huán)境污染。

（九）產(chǎn)品技術(shù)要求

申請人應(yīng)當在原材料質(zhì)量和生產(chǎn)工藝穩(wěn)定的前提下，根據(jù)申請人產(chǎn)品研制、前期臨床評價等結(jié)果，依據(jù)國家標準、行業(yè)標準及有關(guān)文獻，按照《關(guān)于發(fā)布醫(yī)療器械產(chǎn)品技術(shù)要求編寫指導原則的通告》（國家食品藥品監(jiān)督管理總局通告2014年第9號）的有關(guān)要求，編寫產(chǎn)品技術(shù)要求，內(nèi)容主要包含產(chǎn)品性能指標和檢驗方法。

進口產(chǎn)品的產(chǎn)品技術(shù)要求應(yīng)當包括英文版和中文版，英文版應(yīng)當由申請人簽章，中文版由申請人或其代理人簽章。

1.產(chǎn)品適用的相關(guān)標準：

（1）GB/T 21415-2008 《體外診斷醫(yī)療器械生物樣品中量的測量校準品和控制物質(zhì)賦值的計量學溯源性》

（2）GB/T 26124-2011 《臨床化學體外診斷試劑盒》

（3）YY/T 0316-2008 《醫(yī)療器械風險管理對醫(yī)療器械的應(yīng)用》

（4）YY/T 0638-2008 《體外診斷醫(yī)療器械生物樣品中量的測量校準品和控制物質(zhì)物中酶催化濃度賦值的計量學溯源性》

（5）YY/T 1234-2014 《堿性磷酸酶測定試劑盒（NPP底物-AMP緩沖液法）》

2.主要性能指標：

（1）外觀：

應(yīng)與申請人聲稱試劑外觀一致。這里可以包括試劑盒包裝外觀、試劑內(nèi)包裝外觀、試劑的外觀。

（2）裝量（凍干品不適用）：

試劑裝量應(yīng)不少于標示裝量。

（3）試劑空白吸光度：

用生理鹽水作為空白加入工作試劑作為樣品測試時，試劑空白吸光度應(yīng)不大于企業(yè)規(guī)定的要求。

（4）試劑空白吸光度變化率：

用生理鹽水作為空白加入工作試劑作為樣品測試時，試劑空白吸光度變化率△A/min(37℃，405nm,1cm)≤0.005。

（5）分析靈敏度

按照試劑說明書設(shè)置上機參數(shù)，用試劑盒測試（120±12）U/L的樣本，記錄在試劑盒規(guī)定參數(shù)下產(chǎn)生的吸光度改變，換算為120U/L的吸光度變化率（ΔA/min），應(yīng)符合生產(chǎn)企業(yè)給定范圍。

（6）線性范圍

用達到線性范圍上限活性的樣品和達到線性范圍下限活性的樣品，混合成至少5個稀釋濃度（xi）。分別測試試劑盒，每個稀釋濃度測試3次，分別求出測定結(jié)果的均值（yi）。以稀釋濃度（xi）為自變量，以測定結(jié)果均值（yi）為因變量求出線性回歸方程。按公式（1）計算線性回歸的相關(guān)系數(shù)（r）。

稀釋濃度（xi）代入求出線性回歸方程，計算yi的估計值及yi與估計值的相對偏差或絕對偏差。

線性范圍應(yīng)至少達到但不限于25U/L—750U/L（下限不得高于25U/L，上限不得低于750U/L）。

①相關(guān)系數(shù)（r）

線性相關(guān)系數(shù)︱r︱應(yīng)不小于0.990。

（線性范圍下限應(yīng)不低于產(chǎn)品的最低檢測限，不高于參考范圍下限）

②[25，100]U/L范圍內(nèi)，線性絕對偏差應(yīng)不超過±10U/L；[100，750] U/L范圍內(nèi)，線性相對偏差應(yīng)不超過±10%。

（7）測量精密度

①批內(nèi)重復(fù)性

在重復(fù)性條件下，用試劑盒測試（120±12）U/L的樣本或質(zhì)控樣品，重復(fù)測試至少10次（n≥10），分別計算測量值的平均值（）和標準差（s）。計算變異系數(shù)（CV）,應(yīng)不大于5%。

②批內(nèi)瓶間差（干粉或凍干試劑）

用(120±12) U/L的樣本或質(zhì)控樣品測試同一批號的10個待檢試劑盒，并計算10個測量值的平均值（1）和標準差（s1）。

用(120±12) U/L的樣本或質(zhì)控樣品對該批號的1個待檢試劑盒重復(fù)測試10次，計算結(jié)果的均值（2）和標準差（s2）。按公式（2）、（3）計算瓶間差的變異系數(shù)（CV）。

當s1＜s2時，令CV=0

每個濃度下試劑盒批內(nèi)瓶間差均應(yīng)不大于5%。

③批間差

用(120±12) U/L的樣本或質(zhì)控樣品分別測試3個不同批號的試劑盒，每個批號測試3次，分別計算每批3次測定的均值(i=1,2,3)，按公式（4）、（5）計算相對極差（R）。

式中：

試劑盒批間差相對極差應(yīng)不大于10%。

（8）準確度

①相對偏差：

試劑盒測試可用于評價常規(guī)方法的有證參考物質(zhì)（CRM）3次，測試結(jié)果記為（xi）,按式（6）分別計算相對偏差（Bi），3次結(jié)果相對偏差均應(yīng)不超過±10%，1次不符合要求時，應(yīng)重新連續(xù)測試20次，并分別按照式（6）計算相對偏差（Bi），當大于等于19次結(jié)果的相對偏差不超過±10%，視為符合要求。

式中：

xi—測試結(jié)果；

T—有證參考物質(zhì)標示值，或各濃度人源樣品定值。

也可用由參考測量程序定制的參考區(qū)間上線和參考區(qū)間上限2至5倍濃度水平各一個人源樣本（可適當添加被測物，以獲得高濃度的樣本），按照上述方法對試劑盒準確度進行測試。

②比對試驗：

用待測試劑盒與申請人選定分析系統(tǒng)（已在國內(nèi)上市）分別檢測不少于40個在檢測范圍內(nèi)的人源樣品，用線性回歸方法計算兩組結(jié)果的相關(guān)系數(shù)r2≥0.95, [25，100]U/L范圍內(nèi)，偏差應(yīng)不超過±10U/L；(100，750] U/L范圍內(nèi)，偏差不超過±10%。

（9）穩(wěn)定性

檢測已到期試劑或取有效期內(nèi)樣品根據(jù)生產(chǎn)企業(yè)聲稱的熱穩(wěn)定性條件下放置，產(chǎn)品性能應(yīng)符合試劑空白吸光度、試劑空白吸光度變化率、分析靈敏度、線性、測量精密度、準確度要求。

凍干品應(yīng)同時進行復(fù)溶穩(wěn)定性試驗，復(fù)溶后放置到有效期末，產(chǎn)品性能應(yīng)符合試劑空白吸光度、試劑空白吸光度變化率、分析靈敏度、線性、測量精密度、準確度要求。

（10）校準品和質(zhì)控品的性能指標（如產(chǎn)品中包含）

應(yīng)至少包含外觀、裝量（干粉試劑可不做）、準確性、均一性、穩(wěn)定性。凍干型校準品和質(zhì)控品還應(yīng)檢測批內(nèi)瓶間差和復(fù)溶穩(wěn)定性。

（十）注冊檢驗報告

具有相應(yīng)醫(yī)療器械檢驗資質(zhì)和承檢范圍的醫(yī)療器械檢驗機構(gòu)出具的注冊檢驗報告和產(chǎn)品技術(shù)要求預(yù)評價意見。

堿性磷酸酶產(chǎn)品目前尚無國家標準品、參考品，如果申報試劑今后有適用的國家標準品、參考品發(fā)布，則申請人應(yīng)在產(chǎn)品技術(shù)要求中提出相應(yīng)檢測要求。

（十一）產(chǎn)品說明書

說明書承載了產(chǎn)品預(yù)期用途、檢驗方法、對檢驗結(jié)果的解釋以及注意事項等重要信息，是指導實驗室工作人員正確操作、臨床醫(yī)生針對檢驗結(jié)果給出合理醫(yī)學解釋的重要依據(jù)，因此，產(chǎn)品說明書是體外診斷試劑注冊申報最重要的文件之一。

結(jié)合《關(guān)于發(fā)布體外診斷試劑說明書編寫指導原則的通告》（國家食品藥品監(jiān)督管理總局通告2014年第17號）的要求，下面對堿性磷酸酶測定試劑盒說明書的重點內(nèi)容進行詳細說明。

1.【產(chǎn)品名稱】

（1）根據(jù)《辦法》中的命名原則，產(chǎn)品名稱通常由被測物質(zhì)的名稱、用途、方法或原理三部分組成，方法或原理部分應(yīng)能體現(xiàn)具體反應(yīng)原理，建議參考分類目錄或行業(yè)標準。例如：堿性磷酸酶測定試劑盒（NPP底物-AMP緩沖液法）。

（2）英文名稱應(yīng)當正確、完整、直譯，不宜只寫縮寫。

2.【包裝規(guī)格】

包裝規(guī)格應(yīng)明確單、雙或其他多試劑類型；如不同包裝規(guī)格有與之特定對應(yīng)的機型，則應(yīng)同時明確適用機型。如有貨號，可增加貨號信息。

如：試劑1:1×60mL,試劑2: 1×15mL  日立7170生化分析儀

3.【預(yù)期用途】應(yīng)至少包括以下幾部分內(nèi)容：

3.1說明試劑盒用于體外定量檢測血清、血漿和/或其他體液中堿性磷酸酶的活性；同時應(yīng)明確與目的檢測物相關(guān)的臨床適應(yīng)癥背景情況。

3.2堿性磷酸酶異常情況常見于哪些疾病，其升高或降低可能有哪些醫(yī)學解釋。

如：堿性磷酸酶主要用于阻塞性黃疸、肝膽疾病、骨組織疾病等的檢查。生理性增高：兒童在生理性的骨骼發(fā)育期，堿性磷酸酶活力可比正常人高1—2倍；病理性升高：(1)骨骼疾病如佝僂病、軟骨病等；(2)肝膽疾病如肝外膽道阻塞、肝硬化、毛細膽管性肝炎等；(3)其他疾病如甲狀旁腺機能亢進。病理性降低：見于重癥慢性腎炎、兒童甲狀腺機能不全、貧血等。

作為支持性資料，申請人應(yīng)提供由教科書、臨床專著、核心期刊文獻或英文SCI文獻等有關(guān)臨床適應(yīng)癥背景的資料。

4.【檢驗原理】應(yīng)結(jié)合產(chǎn)品主要成分簡要說明檢驗的原理、方法，必要時可采取圖示方法表示，檢測原理的描述應(yīng)結(jié)合產(chǎn)品主要組成成分、被測物和產(chǎn)物的關(guān)系進行描述：

如：本產(chǎn)品以磷酸對硝基苯酚（4-NPP）為底物，2-氨基-2-甲基-1-丙醇（AMP）為磷酸?；荏w物質(zhì)，增進酶反應(yīng)速率，在堿性磷酸酶（ALP）催化下，4-NPP分裂出磷酸基團，生成游離的對硝基苯酚（4-NP），后者在堿性溶液中轉(zhuǎn)變成醌式結(jié)構(gòu)，呈現(xiàn)較深的黃色。反應(yīng)式如下：

由于反應(yīng)中4-NP的生成速率與ALP活性呈正比，因此在37℃、405nm波長下監(jiān)測吸光度上升速率，可得出ALP的活性。

5.【主要組成成分】應(yīng)明確以下內(nèi)容：

試劑盒提供的試劑組分的名稱、比例或濃度，各組分是否可以互換；如含有校準品或質(zhì)控品，除明確組成成份及生物學來源外，還應(yīng)明確其定值及溯源性，溯源性應(yīng)寫明溯源的最高級別，包括標準物質(zhì)或參考物的發(fā)布單位及編號，質(zhì)控品應(yīng)明確靶值范圍。

例如：

本試劑盒由試劑1、試劑2和校準品組成：

試劑1：AMP 1.0 mmol/L，硫酸鋅 1.5 mmol/L，醋酸鎂 2.5 mmol/L，N-羥乙基乙二胺三乙酸（HEDTA） 2.5mmol/L。

試劑2：磷酸-4-硝基苯酚 100 mmol/L，氯化鎂10.5 mmol/L。

校準品：含有堿性磷酸酶的人源血清基質(zhì)，校準品具有批特異性，每批定值，定值見瓶簽標示，量值可溯源至國際參考物質(zhì)JCCLS CRM001b。

6.【儲存條件及有效期】應(yīng)明確未開封的試劑實際儲存條件及有效期，開封后的待機穩(wěn)定期或開瓶穩(wěn)定期。干粉試劑應(yīng)明確復(fù)溶穩(wěn)定期。

注：保存條件不應(yīng)有模糊表述，如“常溫”、“室溫”。

7.【適用儀器】應(yīng)明確可適用的具體品牌、型號的生化分析儀器。

8.【樣本要求】重點明確以下內(nèi)容：樣本類型、處理、保存期限及保存條件（短期、長期），運輸條件等。如有血漿樣本，應(yīng)注明對抗凝劑的要求（如草酸鹽、檸檬酸鹽、EDTA鈉鹽對堿性磷酸酶活性造成干擾，應(yīng)明確避免使用的提示）。冷藏/冷凍樣本檢測前是否須恢復(fù)室溫，可凍融次數(shù)。特殊體液標本還應(yīng)詳細描述對采集條件、保存液、容器要求等可能影響檢測結(jié)果的要求。應(yīng)對已知的干擾物進行說明，如：存在的干擾因素，明確黃疸、溶血、脂濁及藥物等干擾物對測定的影響，同時列出干擾物的具體濃度。

9.【檢驗方法】詳細說明試驗操作的各個步驟，包括：

9.1試劑配制方法、注意事項。

9.2試驗條件：溫度、時間、測定主/副波長、試劑用量、樣本用量、測定方法、反應(yīng)類型、反應(yīng)方向、反應(yīng)時間等以及試驗過程中的注意事項。

9.3校準程序：校準品的使用方法、注意事項、校準曲線的繪制。

9.4質(zhì)量控制程序：質(zhì)控品的使用方法、對質(zhì)控結(jié)果的必要解釋以及推薦的質(zhì)控周期等；建議在本部分注明以下字樣：如果質(zhì)控結(jié)果與預(yù)期不符，提示檢測結(jié)果不可靠，不應(yīng)出具檢測報告。

9.5檢驗結(jié)果的計算或讀?。簯?yīng)明確檢驗結(jié)果的計算方法。超出線性范圍的樣本如進行稀釋，應(yīng)結(jié)合可報告范圍研究結(jié)果明確稀釋液類型和最大可稀釋比例。

10.【參考區(qū)間】應(yīng)注明常用樣本類型的參考區(qū)間，并簡要說明其確定方法。建議注明“由于地理、人種、性別和年齡等差異，建議各實驗室建立自己的參考范圍”。

11.【檢驗結(jié)果的解釋】說明可能對檢驗結(jié)果產(chǎn)生影響的因素，在何種情況下需要進行確認試驗。檢驗結(jié)果的判定方法應(yīng)在【檢驗方法】中明確。

12.【檢驗方法的局限性】說明該檢驗方法的局限性。

13.【產(chǎn)品性能指標】至少應(yīng)詳述以下性能指標，性能指標應(yīng)不低于標準有關(guān)技術(shù)指標的要求。

13.1試劑空白吸光度及試劑空白吸光度變化率；

13.2分析靈敏度；

13.3準確度；

13.4精密度（重復(fù)性和批間差）；

13.5線性范圍（線性相關(guān)系數(shù)和線性偏差）。

14.【注意事項】應(yīng)至少包括以下內(nèi)容：

14.1本試劑盒的檢測結(jié)果僅供臨床參考，對患者的臨床管理應(yīng)結(jié)合其癥狀/體征、病史、其他實驗室檢查及治療反應(yīng)等情況綜合考慮。

14.2本試劑盒僅供體外診斷用，試劑中含有的化學成分接觸人體后是否會產(chǎn)生不良的影響后果。

14.3采用不同方法學的試劑檢測所得結(jié)果不應(yīng)直接相互比較，以免造成錯誤的醫(yī)學解釋；建議實驗室在發(fā)給臨床醫(yī)生的檢測報告注明所用試劑特征。

14.4有關(guān)人源組分的警告，如：試劑盒內(nèi)的質(zhì)控品、校準品或其他人源組分，雖已經(jīng)通過了HBs-Ag、HIV1/2-Ab、HCV-Ab等項目的檢測，但截至目前，沒有任何一項檢測可以確保絕對安全，故仍應(yīng)將這些組分作為潛在傳染源對待。

14.5樣本：（1）采集時間要求、與用藥的先后順序或用藥后時間間隔等；（2）對所有樣本和反應(yīng)廢棄物都應(yīng)視為傳染源對待。

14.6其他有關(guān)堿性磷酸酶測定的注意事項。

15.【標識的解釋】如有圖形或符號，請解釋其代表的意義。

16.【參考文獻】應(yīng)當注明在編制說明書時所引用的參考文獻。

17.【基本信息】

17.1境內(nèi)體外診斷試劑

17.1.1注冊人與生產(chǎn)企業(yè)為同一企業(yè)的按以下格式標注基本信息：

注冊人/生產(chǎn)企業(yè)名稱，住所，聯(lián)系方式，售后服務(wù)單位名稱，聯(lián)系方式，生產(chǎn)地址，生產(chǎn)許可證號。

17.1.2委托生產(chǎn)的按照以下格式標注基本信息：

注冊人名稱，住所，聯(lián)系方式，售后服務(wù)單位名稱，聯(lián)系方式，受托企業(yè)的名稱，住所，生產(chǎn)地址，生產(chǎn)許可證編號。

17.2進口體外診斷試劑

按照以下格式標注基本信息：

注冊人/生產(chǎn)企業(yè)名稱，住所，生產(chǎn)地址，聯(lián)系方式，售后服務(wù)單位名稱，聯(lián)系方式，代理人的名稱，住所，聯(lián)系方式。

18.【醫(yī)療器械注冊證編號/產(chǎn)品技術(shù)要求編號】應(yīng)當寫明醫(yī)療器械注冊證編號/產(chǎn)品技術(shù)要求編號。

19.【說明書核準日期及修改日期】應(yīng)注明該產(chǎn)品說明書的核準日期。如曾進行過說明書的變更申請，還應(yīng)該同時注明說明書的修改日期。

三、參考文獻：

（一）《體外診斷試劑注冊管理辦法》（國家食品藥品監(jiān)督管理總局令第5號）

（二）《醫(yī)療器械說明書和標簽管理規(guī)定》（國家食品藥品監(jiān)督管理總局令第6號）

（三）《醫(yī)療器械產(chǎn)品技術(shù)要求編寫指導原則》（國家食品藥品監(jiān)督管理總局通告2014年第9號）

（四）《體外診斷試劑臨床試驗技術(shù)指導原則》（國家食品藥品監(jiān)督管理總局通告2014年第16號）

（五）《體外診斷試劑說明書編寫指導原則》（國家食品藥品監(jiān)督管理總局通告2014年第17號）

（六）《關(guān)于公布體外診斷試劑注冊申報資料要求和批準證明文件格式的公告》（國家食品藥品監(jiān)督管理總局公告2014年第44號）

（七）《關(guān)于含有牛、羊源性材料醫(yī)療器械注冊有關(guān)事宜的公告》（國食藥監(jiān)械〔2006〕407號）

（八）國家食品藥品監(jiān)督管理部門發(fā)布的其他規(guī)范性文件

（九）GB/T 21415-2008 體外診斷醫(yī)療器械生物樣品中量的測量校準品和控制物質(zhì)賦值的計量學溯源性

（十）GB/T 26124-2011臨床化學體外診斷試劑盒

（十一）YY/T 0316-2008 醫(yī)療器械風險管理對醫(yī)療器械的應(yīng)用

（十二）YY/T 0638-2008 體外診斷醫(yī)療器械生物樣品中量的測量校準品和控制物質(zhì)物中酶催化濃度賦值的計量學溯源性

（十三）YY/T 1227-2014臨床化學體外診斷試劑盒命名

（十四）YY/T 1234-2014堿性磷酸酶測定試劑盒（NPP底物-AMP緩沖液法）

堿性磷酸酶測定試劑盒注冊
技術(shù)審查指導原則（2016年修訂版）編制說明

一、指導原則編制目的

編制本指導原則旨在指導和規(guī)范注冊申請人對堿性磷酸酶測定試劑盒注冊申報資料的準備及撰寫工作，同時幫助審查人員理解和掌握該類產(chǎn)品原理、組成、性能、預(yù)期用途等內(nèi)容，把握技術(shù)審評工作基本要求和尺度，對產(chǎn)品安全性、有效性作出系統(tǒng)評價。

由于堿性磷酸酶測定試劑盒產(chǎn)品仍在不斷發(fā)展，審查人員仍需從風險分析的角度認真確定申報產(chǎn)品的預(yù)期用途與風險管理是否相當；由于我國醫(yī)療器械法規(guī)框架仍在構(gòu)建中，審查人員仍需密切關(guān)注相關(guān)法規(guī)、標準及最新進展，關(guān)注審評產(chǎn)品實際組成、原理、預(yù)期用途等方面的個性特征，以保證產(chǎn)品審評符合現(xiàn)行法規(guī)安全、有效的要求。

本次修訂主要依據(jù)新法規(guī)和新行標，對注冊申報資料的要求和順序進行調(diào)整。同時結(jié)合產(chǎn)品特點，對技術(shù)審評過程中的常見問題和相關(guān)要求在修訂后的指導原則中予以明確。

二、指導原則編制重點內(nèi)容說明

（一）本指導原則根據(jù)《體外診斷試劑注冊申報資料要求和批準證明文件格式》的相關(guān)要求，借鑒國家食品藥品監(jiān)督管理部門已發(fā)布的相關(guān)產(chǎn)品注冊技術(shù)審查指導原則的體例進行修訂。

（二）在產(chǎn)品綜述資料中，全面介紹了堿性磷酸酶產(chǎn)品的預(yù)期用途、產(chǎn)品描述、方法學特征、生物安全性評價、研究結(jié)果總結(jié)以及同類產(chǎn)品上市情況介紹等內(nèi)容。

（三）本指導原則不涉及產(chǎn)品作用機理的內(nèi)容，主要描述相應(yīng)的診斷方法和原理。

（四）產(chǎn)品應(yīng)適用的相關(guān)標準中給出了現(xiàn)行有效的國家標準、行業(yè)標準，本次修訂刪除部分國家標準、行業(yè)標準，保留了與產(chǎn)品密切相關(guān)的參考標準。

（五）產(chǎn)品的主要性能指標中給出了產(chǎn)品需要考慮的各個方面，主要提出共性要求，具體量化指標需要參照相關(guān)的國家標準、行業(yè)標準和生產(chǎn)商技術(shù)能力予以確定。

（六）本次修訂依據(jù)YY/T 1234-2014《堿性磷酸酶測定試劑盒（NPP底物-AMP緩沖液法）》對分析性能評估和產(chǎn)品技術(shù)要求中準確度“相對偏差”的試驗方法進行了修訂。

（七）考慮到已上市產(chǎn)品尚無金標類檢測試劑，適用范圍排除的方法學中，刪除了金標類檢測試劑。

（八）依據(jù)《體外診斷試劑說明書編寫指導原則》要求，將【檢驗方法】中“校準”“質(zhì)量控制”的描述修訂為“校準程序”、“質(zhì)量控制程序”，將【參考值（范圍）】的描述修訂為【參考區(qū)間】、增加了【標識的解釋】欄目、將【生產(chǎn)企業(yè)】修訂為【基本信息】、刪除了【產(chǎn)品標準編號】修訂為【產(chǎn)品技術(shù)要求編號】。【樣本要求】中明確了干擾物的種類，而干擾物對試劑盒檢測結(jié)果造成的影響及干擾物的具體濃度在【檢驗方法的局限性】中予以具體描述?？紤]到申請人可能會對【檢驗方法的解釋】欄目應(yīng)明確的內(nèi)容造成誤解，說明書【檢驗方法的解釋】增加了提示：“檢驗結(jié)果的判定方法應(yīng)在【檢驗方法】中明確”。我們曾考慮將分析性能評估的結(jié)果體現(xiàn)在說明書的【產(chǎn)品性能指標中】，供臨床檢驗實驗室做參考，為避免日常監(jiān)督檢查中造成誤解，建議相關(guān)指標內(nèi)容與產(chǎn)品技術(shù)要求保持一致。企業(yè)也可選擇將分析性能評估結(jié)果寫在該欄目中，但需注明“上述結(jié)果為產(chǎn)品研制中分析性能評估試驗結(jié)果，不低于產(chǎn)品技術(shù)要求”。

（九）產(chǎn)品技術(shù)要求：“擬定產(chǎn)品標準及編制說明”修訂為“產(chǎn)品技術(shù)要求”，刪除了GB/T 191-2008、WS/T 351-2011等與產(chǎn)品相關(guān)度不高的標準。分析靈敏度的試驗方法參照 YY/T 1234-2014堿性磷酸酶測定試劑盒（NPP底物-AMP緩沖液法）進行了修訂，明確了被測物的具體濃度?？紤]到酶類產(chǎn)品的純品較難獲得，且回收試驗易受干擾，本指導原則中準確性研究方法未設(shè)置“回收試驗”方法作為準確度研究的方法。依據(jù)《醫(yī)療器械產(chǎn)品技術(shù)要求編寫指導原則》要求，產(chǎn)品技術(shù)要求刪除了型式檢驗和出廠檢驗要求的描述。

（十）關(guān)于線性偏差以及準確度偏差說明：考慮到，如技術(shù)要求中線性偏差以及準確度（比對試驗）偏差均采用相對偏差進行表述，當對線性范圍中某一極低值樣本進行線性范圍以及準確度（比對試驗）試驗時，其試驗結(jié)果采用絕對偏差符合申請人的規(guī)定更為合理。因此，本指導原則建議企業(yè)可對產(chǎn)品線性偏差以及準確度（比對試驗）偏差進行分段要求，分別采用絕對偏差和相對偏差進行表述?？紤]到線性相關(guān)系數(shù)的結(jié)果可能為負值，線性相關(guān)系數(shù)的要求r不小于0.990修訂為︱r︱應(yīng)不小于0.990。

（十一）關(guān)于分析性能中最低檢測限的說明：最低檢測限的研究有助于合理確定產(chǎn)品線性范圍（線性低值），因此，本指導原則在分析性能評估資料中對產(chǎn)品最低檢測限做出要求。

（十二）注冊檢驗：考慮到檢測結(jié)果的室間一致性及該項目量值的統(tǒng)一性，在注冊檢驗報告要求中明確了一旦國家參考品/標準品發(fā)布，申請人應(yīng)在產(chǎn)品技術(shù)要求中提出檢測要求。

（十三）經(jīng)與中國食品藥品檢定研究院核實，堿性磷酸酶尚無國家標準品，刪除了該產(chǎn)品有國家標準品的描述。

（十四）關(guān)于參考區(qū)間的驗證資料中對健康個體至少120例的說明：此例數(shù)的規(guī)定，結(jié)合已發(fā)布產(chǎn)品技術(shù)審查指導原則，并參考WS/T 402-2012《臨床實驗室檢驗項目參考區(qū)間的制定》以及C28-A2《如何確定臨床檢驗的參考區(qū)間：批準指南（2000）》。

（十五）關(guān)于產(chǎn)品穩(wěn)定性：產(chǎn)品技術(shù)要求“穩(wěn)定性”部分，考慮到行標對熱穩(wěn)定性的接受程度，本指導原則修訂時將熱穩(wěn)定性下的穩(wěn)定性指標作為產(chǎn)品技術(shù)要求可接受的方法。但由于該行業(yè)標準的起草早于GB/T 26124-2011，且產(chǎn)品穩(wěn)定性是體外診斷試劑的重要性能，因此在性能指標要求上未采納行業(yè)標準要求的“試劑空白、線性、準確度”而選擇產(chǎn)品的全部主要性能指標進行考察。

（十六）關(guān)于臨床試驗兩家臨床試驗機構(gòu)所選的參比試劑應(yīng)一致的說明：考慮到臨床試驗的可操作性，不同臨床試驗機構(gòu)日常使用的生化分析儀品牌型號的差異，本次修訂將兩家臨床機構(gòu)使用機型一致的要求刪除。只要臨床研究所使用的儀器分別為待評試劑和參比試劑的適用機型即可。臨床試驗總結(jié)報告撰寫（3）統(tǒng)計學分析中斜率b的置信區(qū)間刪除了99%，保留了常用的95%。對同時適用多種樣本類型的例數(shù)參照《體外診斷試劑臨床試驗技術(shù)指導原則》中規(guī)定進行明確。

（十七）本次修訂刪除了不良事件、生產(chǎn)記錄及其檢驗記錄、包裝標簽、符合性聲明等內(nèi)容。

三、指導原則審校意見采納情況

（一）采納情況

1.“空白吸光度、空白吸光度變化率”已統(tǒng)一規(guī)范為“試劑空白吸光度、試劑空白吸光度變化率”。

2.擬定產(chǎn)品技術(shù)要求中，試劑空白吸光度以及試劑空白吸光度變化率試驗用樣本類型，由“蒸餾水、去離子水或其他指定溶液”修訂為“生理鹽水”；線性偏差規(guī)范描述為“[25,100]U/L范圍內(nèi)，偏差應(yīng)不超過±10U/L；(100,750] U/L范圍內(nèi)，偏差不超過±10%?！?，與行業(yè)標準保持一致。相對偏差“T-有證參考物質(zhì)標示值”采納審校意見修訂為“T-有證參考物質(zhì)標示值，或各濃度人源樣品定值”。

3.分析性能評估資料關(guān)于“不同包裝規(guī)格分析性能評估的要求”，已按審校意見修訂為“如不同包裝規(guī)格之間不存在性能差異，需要提交包裝規(guī)格之間不存在性能差異的詳細說明，具體說明不同包裝規(guī)格之間的差別及可能產(chǎn)生的影響”。

4.注冊檢驗報告關(guān)于“出具至少三個批次樣品的注冊檢驗報告和產(chǎn)品技術(shù)要求預(yù)評價意見”，已按審校意見修訂為“具有相應(yīng)醫(yī)療器械檢驗資質(zhì)的醫(yī)療器械檢驗機構(gòu)出具的注冊檢驗報告和產(chǎn)品技術(shù)要求預(yù)評價意見”。

5.正文和參考文獻中引用的法規(guī)名稱、文號等已補充完整。正文中出現(xiàn)的用詞、符號和字體等問題已按審校建議修訂。

四、指導原則編寫單位和人員

本指導原則修訂人員由浙江省醫(yī)療器械技術(shù)審評人員、行政審批人員、檢驗和臨床專家、產(chǎn)品專業(yè)廠家代表等共同組成。