做醫(yī)療器械注冊的，特別是體外診斷試劑這塊，經(jīng)常碰到臨床評價的難題。今天聊的這個情況就很典型：你想拿一個已經(jīng)上市的產(chǎn)品（對比試劑）來證明你家新研發(fā)的試劑（考核試劑）性能不錯，結(jié)果發(fā)現(xiàn)，人家對比試劑能測的濃度范圍（線性范圍）比你家的窄。你家試劑能測到很高的濃度，但對比試劑測這么高可能就不準(zhǔn)了或者直接測不出來了。這時候，有人就想，那把樣本稀釋一下再讓對比試劑測，不就能比了嗎？聽起來好像是個辦法，但這個操作到底行不行？

第一步：搞明白“線性范圍”和為啥要對比

簡單說，“線性范圍”就是這個試劑能準(zhǔn)確測量的濃度范圍。在這個范圍內(nèi)，濃度和檢測信號是成比例的，結(jié)果才可靠。臨床評價拿對比試劑來比，就是想看看你家新試劑測出來的結(jié)果，跟一個大家公認(rèn)靠譜的試劑測出來的結(jié)果是不是一致，證明你家試劑也挺準(zhǔn)的。

現(xiàn)在的問題是，對比試劑的“尺子”不夠長，量不了你家試劑能量的最高點。這時候稀釋樣本，就相當(dāng)于把高濃度的樣本“沖淡”一點，讓它落到對比試劑的“尺子”能量準(zhǔn)的范圍內(nèi)，然后再測。測出來的結(jié)果，再乘以稀釋倍數(shù)，換算回原來的濃度，跟你家試劑直接測的結(jié)果去比。

第二步：能不能稀釋，關(guān)鍵看說明書

這個稀釋的點子，到底能不能用？最直接、最關(guān)鍵的答案在這里：看對比試劑自己的說明書！

（1）說明書說“行”，那可以考慮。如果對比試劑的生產(chǎn)廠家白紙黑字寫在說明書里，說他們的產(chǎn)品在某個濃度以上，可以用某種特定的方法（比如用特定的稀釋液，按某個倍比方式）稀釋樣本后再測，并且測出來的結(jié)果乘以稀釋倍數(shù)后是有效的，那這個操作就有依據(jù)了。這種情況下，你按照人家說明書規(guī)定的方法去稀釋、去測、去換算，理論上是可以用來跟考核試劑做比對的。

（2）說明書沒說或者明確說“不行”，那千萬別硬來。如果說明書壓根沒提稀釋這回事，或者明確寫了樣本不能稀釋、稀釋后結(jié)果無效之類的，那你要是自己動手稀釋了，測出來的結(jié)果就完全沒譜了。這結(jié)果再拿來跟考核試劑比，一點說服力都沒有，審評老師肯定不會認(rèn)的。為啥呢？因為廠家沒驗證過稀釋后的性能，你這么做等于是在用人家沒認(rèn)可、沒保證的操作方式，結(jié)果當(dāng)然不可信。

第三步：稀釋操作可不是那么簡單

就算說明書允許稀釋，這事也沒那么簡單。稀釋會引入一堆新問題：

1.稀釋液選啥？你用啥液體來稀釋樣本？生理鹽水？專用稀釋液？還是其他的？不同的稀釋液可能對樣本里的待測物質(zhì)有影響，比如會不會破壞它？會不會干擾檢測反應(yīng)？這都得按說明書來，說明書說用啥就用啥。

2.稀釋倍數(shù)怎么定？說明書通常會規(guī)定最大可稀釋倍數(shù)。比如，只能稀釋2倍、5倍或者10倍。你不能為了硬要測一個特別高的濃度，就自作主張稀釋個幾十上百倍。稀釋倍數(shù)越大，樣本被“沖”得越淡，誤差放大的倍數(shù)也越大，結(jié)果可能就越不準(zhǔn)。必須嚴(yán)格遵守說明書允許的最大倍數(shù)。

3.操作誤差變大了。稀釋本身就是一個操作步驟。加多少樣本，加多少稀釋液，混勻得好不好，每一步都可能帶來誤差。本來直接測可能挺準(zhǔn)的，一稀釋，操作上的小誤差就被放大了（乘以稀釋倍數(shù)），最終結(jié)果的可靠性就下降了。

4.稀釋后性能還一樣嗎？說明書說稀釋后結(jié)果有效，那也是廠家在自己驗證過的條件下得出的結(jié)論。你稀釋后，樣本的基質(zhì)（就是樣本的整體環(huán)境）變了，對比試劑在稀釋后的樣本基質(zhì)里是不是還能保持原來的準(zhǔn)確度、精密度？這個其實是有疑問的。稀釋本身就可能帶來所謂的“基質(zhì)效應(yīng)”。

5.考核試劑那邊咋辦？你稀釋了樣本給對比試劑測，那考核試劑呢？是測稀釋前的原樣，還是測稀釋后的樣本？如果考核試劑也測稀釋后的樣本，那比較的是稀釋后的結(jié)果一致性。如果考核試劑測原樣，對比試劑測稀釋換算后的結(jié)果，這相當(dāng)于在比較兩個不同處理流程下的結(jié)果，可比性就更復(fù)雜了。方案設(shè)計要特別清楚這點。

第四步：開發(fā)階段就要想清楚

其實啊，碰到對比試劑線性范圍不夠用的情況，回過頭來想想，在研發(fā)你家考核試劑的時候，是不是非得把線性范圍做那么寬？

（1）臨床實際需要多寬？醫(yī)生看病，診斷疾病，真正需要檢測的濃度范圍到底是多大？你把范圍做太寬了，可能超出實際臨床需求，不僅增加研發(fā)難度和成本，還讓穩(wěn)定性變得更難控制。

（2）范圍太寬反成負(fù)擔(dān)。追求過寬的線性范圍，可能在臨床評價時給自己挖坑，就像現(xiàn)在遇到的這個稀釋難題。而且范圍太寬，日常使用中碰到極端高值的機會很少，反而增加了產(chǎn)品不必要的復(fù)雜性和潛在風(fēng)險。

所以，在設(shè)計考核試劑的線性范圍時，一定要緊密結(jié)合臨床應(yīng)用的實際需求，夠用就好，別盲目貪寬。

總結(jié)一下

回到最初的問題：臨床評價時對比試劑的線性范圍無法覆蓋考核試劑，可以倍比稀釋后進(jìn)行比對嗎？

（1）核心前提：對比試劑說明書必須明確允許樣本稀釋，并且說明了稀釋方法和最大稀釋倍數(shù)。這是硬性條件，沒得商量。

（2）操作要規(guī)范：必須嚴(yán)格按照說明書的要求來選稀釋液、定稀釋倍數(shù)、進(jìn)行操作。

（3）風(fēng)險要知道：稀釋會引入額外的操作誤差和基質(zhì)效應(yīng)風(fēng)險，可能影響結(jié)果可比性和評價的可靠性。

（4）方案要寫清：臨床評價方案里必須詳細(xì)描述稀釋操作流程、結(jié)果換算方法、以及為什么認(rèn)為這樣操作后得到的結(jié)果仍然有效、可比。

（5）根源要反思：在考核試劑開發(fā)階段，就應(yīng)該基于臨床實際需求合理設(shè)定線性范圍，避免范圍過寬帶來后續(xù)評價困難。

說白了，稀釋這個辦法，在滿足特定條件（說明書允許）時，理論上是一條“出路”，但它絕不是個省心省力的好辦法，會帶來一堆技術(shù)挑戰(zhàn)和審評上的疑問。能不用盡量別用，真要用，必須把依據(jù)做足，操作做規(guī)范，風(fēng)險考慮周全。思途CRO在幫客戶處理這類項目時，都會特別強調(diào)這些關(guān)鍵點。大家在做臨床評價方案設(shè)計前，一定要把對比試劑的說明書吃透！