附件：人類免疫缺陷病毒檢測(cè)試劑臨床試驗(yàn)注冊(cè)審查指導(dǎo)原則（2023年修訂版）（2024年第4號(hào)）.doc

人類免疫缺陷病毒檢測(cè)試劑臨床試驗(yàn)注冊(cè)審查指導(dǎo)原則（2023年修訂版）

本指導(dǎo)原則旨在指導(dǎo)注冊(cè)申請(qǐng)人對(duì)人類免疫缺陷病毒檢測(cè)試劑臨床試驗(yàn)的設(shè)計(jì)及開展，同時(shí)也為技術(shù)審評(píng)部門對(duì)注冊(cè)申報(bào)資料的技術(shù)審評(píng)提供參考。

本指導(dǎo)原則是針對(duì)人類免疫缺陷病毒檢測(cè)試劑臨床評(píng)價(jià)的一般要求，申請(qǐng)人應(yīng)依據(jù)產(chǎn)品的具體特性確定其中內(nèi)容是否適用，若不適用，需具體闡述理由及相應(yīng)的科學(xué)依據(jù)，并依據(jù)產(chǎn)品的具體特性對(duì)注冊(cè)申報(bào)資料的內(nèi)容進(jìn)行充實(shí)和細(xì)化。

本指導(dǎo)原則是對(duì)申請(qǐng)人和審查人員的指導(dǎo)性文件，但不包括注冊(cè)審批所涉及的行政事項(xiàng)，亦不作為法規(guī)強(qiáng)制執(zhí)行，如果有能夠滿足相關(guān)法規(guī)要求的其他方法，也可以采用，但需要詳細(xì)闡明理由，并對(duì)其科學(xué)合理性進(jìn)行驗(yàn)證，提供詳細(xì)的研究資料和驗(yàn)證資料，相關(guān)人員應(yīng)在遵循相關(guān)法規(guī)的前提下使用本指導(dǎo)原則。

本指導(dǎo)原則是在現(xiàn)行法規(guī)和標(biāo)準(zhǔn)體系以及當(dāng)前認(rèn)知水平下制定的，隨著法規(guī)和標(biāo)準(zhǔn)的不斷完善，以及科學(xué)技術(shù)的不斷發(fā)展，本指導(dǎo)原則相關(guān)內(nèi)容也將適時(shí)進(jìn)行調(diào)整。

一、適用范圍

人類免疫缺陷病毒（Human Immunodeficiency Virus，HIV）檢測(cè)試劑是指利用免疫學(xué)及分子生物學(xué)等方法原理對(duì)人血清、血漿或其他體液中的特定的HIV生物學(xué)標(biāo)記物，包括HIV 1型（HIV-1）p24抗原、HIV抗體、HIV核酸等進(jìn)行定量或定性分析的試劑。

本指導(dǎo)原則適用于利用免疫層析法、化學(xué)發(fā)光法、時(shí)間分辨免疫熒光法、免疫印跡法等免疫學(xué)方法對(duì)HIV抗原和/或抗體進(jìn)行定性檢測(cè)的體外診斷試劑，以及應(yīng)用分子生物學(xué)方法（如實(shí)時(shí)熒光聚合酶鏈反應(yīng)等）對(duì)HIV核糖核酸進(jìn)行定量或定性檢測(cè)和分析的體外診斷試劑，適用于首次注冊(cè)產(chǎn)品及申請(qǐng)變更注冊(cè)的產(chǎn)品。

本指導(dǎo)原則不適用于國家法定血源篩查用HIV檢測(cè)試劑。

二、臨床試驗(yàn)設(shè)計(jì)

臨床試驗(yàn)的開展、方案的制定以及報(bào)告的撰寫等均應(yīng)符合相關(guān)法規(guī)及《體外診斷試劑臨床試驗(yàn)技術(shù)指導(dǎo)原則》的要求，如相關(guān)法規(guī)、文件有更新，臨床試驗(yàn)應(yīng)符合更新后的要求。

（一）臨床試驗(yàn)設(shè)計(jì)

1.臨床試驗(yàn)機(jī)構(gòu)及人員

申請(qǐng)人應(yīng)選擇不少于3家經(jīng)醫(yī)療器械臨床試驗(yàn)機(jī)構(gòu)備案的臨床機(jī)構(gòu)開展臨床試驗(yàn)。建議在選擇臨床單位時(shí)，綜合流行病學(xué)背景、HIV的特性等因素選擇臨床試驗(yàn)機(jī)構(gòu)，臨床試驗(yàn)機(jī)構(gòu)的實(shí)驗(yàn)操作人員應(yīng)熟悉檢測(cè)系統(tǒng)的各環(huán)節(jié)（儀器、試劑、質(zhì)控及操作程序等），熟悉臨床試驗(yàn)方案。

2.臨床試驗(yàn)適用人群和樣本類型

    2.1適用人群

對(duì)于不同的檢測(cè)試劑，其預(yù)期用途不同，因此入組人群亦不同。申請(qǐng)人應(yīng)根據(jù)不同的要求入組適用人群開展臨床試驗(yàn)。

對(duì)于HIV抗體檢測(cè)、抗原抗體聯(lián)合檢測(cè)、HIV核酸定性檢測(cè)試劑，預(yù)期用途為HIV感染的輔助診斷。入組人群應(yīng)為疑似HIV感染的人群，包括具有HIV相關(guān)的癥狀/體征、以及有相關(guān)流行病學(xué)史的人群。應(yīng)納入HIV感染的不同進(jìn)展階段，包括急性期、無癥狀感染期及艾滋病期病例。為考察申報(bào)產(chǎn)品的特異度，臨床試驗(yàn)中還應(yīng)納入可能會(huì)對(duì)試劑檢測(cè)造成干擾的樣本，如自身免疫病患者、類風(fēng)濕因子（RF）陽性的病例、孕婦以及其他可能會(huì)造成交叉反應(yīng)的病原體（乙型肝炎病毒、丙型肝炎病毒等）感染的病例等。對(duì)于HIV抗體檢測(cè)第三代發(fā)光類試劑,應(yīng)選擇至少5套經(jīng)過全面驗(yàn)證的陽轉(zhuǎn)血清盤進(jìn)行檢測(cè)，對(duì)于抗原抗體聯(lián)合檢測(cè)第四代發(fā)光類試劑，應(yīng)選擇至少10套經(jīng)過全面驗(yàn)證的陽轉(zhuǎn)血清盤進(jìn)行檢測(cè)，以評(píng)價(jià)申報(bào)產(chǎn)品對(duì)于HIV感染早期的檢出能力。對(duì)于抗原抗體聯(lián)合檢測(cè)試劑，為充分評(píng)價(jià)抗原的檢測(cè)性能，應(yīng)納入至少10例單獨(dú)抗原陽性的樣本，如臨床試驗(yàn)中難以獲得，可使用商業(yè)化的血清盤進(jìn)行檢測(cè)。

對(duì)于 HIV RNA定量檢測(cè)試劑，預(yù)期用途為通過對(duì)患者血清或血漿中人類免疫缺陷病毒核酸基線水平和變化情況的監(jiān)測(cè)，用于評(píng)估抗病毒治療的應(yīng)答和治療效果。入組人群應(yīng)以已確診HIV感染的病例為主，應(yīng)包括正在接受抗病毒治療的患者以及未接受抗病毒治療的患者，確保樣本HIV病毒載量覆蓋申報(bào)產(chǎn)品的線性范圍。同時(shí)應(yīng)入組一部分陰性病例來考察其檢測(cè)的特異度。如此類試劑預(yù)期用途除用于治療監(jiān)測(cè)外，還可用于HIV感染的輔助診斷，則還應(yīng)按照上述關(guān)于輔助診斷預(yù)期用途的臨床試驗(yàn)設(shè)計(jì)開展相應(yīng)的臨床評(píng)價(jià)。

對(duì)于HIV抗體檢測(cè)試劑（免疫印跡法），預(yù)期用途為用于經(jīng)HIV抗體篩查試驗(yàn)復(fù)檢為有反應(yīng)性的樣本的確認(rèn)。入組人群應(yīng)以HIV抗體篩查試驗(yàn)復(fù)檢為有反應(yīng)性的病例。為了能夠考察確證試劑的特異度，臨床試驗(yàn)中應(yīng)納入一定數(shù)量的經(jīng)確證試劑檢測(cè)為陰性的人群。

我國境內(nèi)流行的HIV主要為HIV-1型M組，其常見的基因型主要為B/B’、BC重組型（包括CRF 07_BC重組型和CRF 08_BC重組型）以及AE重組型（CRF 01_AE重組型）。在選擇HIV感染者病例時(shí)，首先應(yīng)根據(jù)HIV流行的情況，選擇能代表我國不同地區(qū)流行基因型的HIV-1感染者病例，以對(duì)試劑檢測(cè)我國流行的HIV-1病毒的能力進(jìn)行客觀科學(xué)的評(píng)價(jià)?？贵w檢測(cè)試劑以及抗原抗體檢測(cè)試劑，常見基因型每種不少于10例。對(duì)于核酸檢測(cè)試劑，每種常見基因型應(yīng)至少30例，同時(shí)按基因型對(duì)樣本進(jìn)行亞組分析。對(duì)于我國境內(nèi)罕見的基因型（1型O組、2型），也應(yīng)進(jìn)行適當(dāng)驗(yàn)證，樣本應(yīng)經(jīng)過科學(xué)的驗(yàn)證和確認(rèn)，考慮到此類樣本的不易獲得性，樣本可來源于HIV感染者，也可來源于經(jīng)過科學(xué)驗(yàn)證的血清盤。

臨床試驗(yàn)中還應(yīng)注意納入一定數(shù)量的低滴度/弱陽性樣本。

2.2樣本類型

樣本類型一般為血清、血漿。如經(jīng)臨床前研究證明分析性能沒有差異，例如血清和血漿樣本，則臨床試驗(yàn)中可進(jìn)行匯總統(tǒng)計(jì)。對(duì)于口腔粘膜滲出液、尿液等體液樣本，應(yīng)單獨(dú)進(jìn)行臨床評(píng)價(jià)。

臨床樣本的處理、保存和核酸提取等應(yīng)分別滿足申報(bào)產(chǎn)品說明書及對(duì)比試劑說明書的相關(guān)要求。

3.對(duì)比方法的選擇

對(duì)于已有已上市同類產(chǎn)品的試劑，可選擇境內(nèi)已批準(zhǔn)上市、臨床普遍認(rèn)為質(zhì)量較好的同類產(chǎn)品作為對(duì)比試劑，采用試驗(yàn)體外診斷試劑與之進(jìn)行對(duì)比試驗(yàn)研究，考察申報(bào)產(chǎn)品與對(duì)比試劑的一致性。對(duì)比試劑的選擇應(yīng)從預(yù)期用途、樣本要求、檢測(cè)性能等方面，確認(rèn)其與申報(bào)產(chǎn)品具有較好的可比性。

對(duì)于無已上市同類產(chǎn)品的新HIV檢測(cè)試劑，應(yīng)采用試驗(yàn)體外診斷試劑與臨床參考標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行比較研究。臨床參考標(biāo)準(zhǔn)即參照臨床公認(rèn)的臨床診療指南、艾滋病診斷標(biāo)準(zhǔn)等進(jìn)行病例診斷的方法。對(duì)于核酸定量檢測(cè)試劑同時(shí)還應(yīng)對(duì)其量值與疾病進(jìn)展?fàn)顩r、轉(zhuǎn)歸、治療情況等的相關(guān)性進(jìn)行分析。

對(duì)于口腔粘膜滲出液、尿液等體液樣本，無論申報(bào)產(chǎn)品采用何種檢驗(yàn)方法，均應(yīng)采用來自同一患者的血液樣本進(jìn)行同源對(duì)比試驗(yàn)。檢測(cè)血液樣本用對(duì)比試劑的檢測(cè)性能應(yīng)盡量高于申報(bào)產(chǎn)品。

4.最低樣本量

臨床試驗(yàn)樣本量應(yīng)采用適當(dāng)?shù)慕y(tǒng)計(jì)學(xué)方法進(jìn)行估算，并詳細(xì)描述所使用統(tǒng)計(jì)方法及各參數(shù)的確定依據(jù)。

對(duì)于抗體檢測(cè)、抗原抗體聯(lián)合檢測(cè)以及核酸定性檢測(cè)試劑，此部分臨床試驗(yàn)?zāi)康臑樵u(píng)估兩種檢測(cè)方法之間的一致性，因此建議采用單組目標(biāo)值法公式進(jìn)行最低樣本量的估算。通過陽性符合率和陰性符合率來分別計(jì)算所需陽性樣本和陰性樣本的例數(shù)。陽性、陰性符合率的臨床可接受標(biāo)準(zhǔn)（P0）一般建議不低于98%。

公式中，n為樣本量；Z1-α/2、Z1-β為顯著性水平和把握度的標(biāo)準(zhǔn)正態(tài)分布的分?jǐn)?shù)位，P0為評(píng)價(jià)指標(biāo)的臨床可接受標(biāo)準(zhǔn)，PT為申報(bào)產(chǎn)品評(píng)價(jià)指標(biāo)預(yù)期值。

對(duì)于核酸定量檢測(cè)試劑，也應(yīng)選擇合適的樣本量估算的方法進(jìn)行最低樣本量的估算。應(yīng)注意所納入的臨床樣本應(yīng)覆蓋申報(bào)產(chǎn)品的線性范圍。

5. 統(tǒng)計(jì)分析

5.1定性檢測(cè)試劑

應(yīng)選擇合適的統(tǒng)計(jì)方法對(duì)臨床試驗(yàn)結(jié)果進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，對(duì)于定性檢測(cè)的一致性評(píng)價(jià)，常選擇交叉四格表的形式總結(jié)兩種方法的結(jié)果，評(píng)價(jià)指標(biāo)一般包括陽性符合率/靈敏度、陰性符合率/特異度，Kappa值等，并計(jì)算相應(yīng)的95%置信區(qū)間。

對(duì)于兩種方法檢測(cè)不一致的樣本，應(yīng)采用臨床參考標(biāo)準(zhǔn)或其他方法再次進(jìn)行確認(rèn)或提供臨床診斷資料以進(jìn)一步明確受試者（采集樣本時(shí)）所處的感染狀態(tài)，同時(shí)結(jié)合患者的臨床癥狀/體征對(duì)差異原因及可能結(jié)果進(jìn)行分析，從而對(duì)申報(bào)產(chǎn)品的性能進(jìn)行客觀科學(xué)的評(píng)價(jià)。

5.2核酸定量檢測(cè)試劑

5.2.1應(yīng)根據(jù)臨床試驗(yàn)數(shù)據(jù)繪制散點(diǎn)圖，進(jìn)行相關(guān)性分析。

5.2.2采用Bland-Altman法，計(jì)算一致性限度，評(píng)價(jià)兩種檢測(cè)結(jié)果的一致性。一致性限度應(yīng)在臨床所能接受的界值范圍內(nèi)。

5.2.3 采用回歸分析對(duì)兩種檢測(cè)方法的一致性進(jìn)行評(píng)價(jià)。應(yīng)根據(jù)數(shù)據(jù)分布特點(diǎn)等因素選擇適用的回歸分析方法，如Passing-Bablok回歸、Deming回歸和最小二乘回歸等。回歸分析應(yīng)重點(diǎn)觀察回歸方程的回歸系數(shù)和截距等指標(biāo)，計(jì)算回歸系數(shù)和截距的95%置信區(qū)間。

5.2.4 選擇交叉四格表的形式總結(jié)兩種試劑的定性檢測(cè)結(jié)果，計(jì)算陽性符合率、陰性符合率和總符合率、Kappa值等，并計(jì)算相應(yīng)的95%置信區(qū)間。

（二）通用要求

1.臨床試驗(yàn)方案

臨床試驗(yàn)實(shí)施前，研究人員應(yīng)從流行病學(xué)、統(tǒng)計(jì)學(xué)、臨床醫(yī)學(xué)、檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)等多方面考慮，設(shè)計(jì)科學(xué)合理的臨床試驗(yàn)方案。各臨床試驗(yàn)機(jī)構(gòu)應(yīng)執(zhí)行統(tǒng)一的臨床試驗(yàn)方案，且保證在整個(gè)臨床試驗(yàn)過程中遵循預(yù)定的方案實(shí)施，不可隨意改動(dòng)。整個(gè)試驗(yàn)過程應(yīng)在臨床試驗(yàn)機(jī)構(gòu)的實(shí)驗(yàn)室內(nèi)并由本實(shí)驗(yàn)室的技術(shù)人員操作完成，申請(qǐng)人的技術(shù)人員除進(jìn)行必要的技術(shù)指導(dǎo)外，不得隨意干涉試驗(yàn)進(jìn)程，尤其是數(shù)據(jù)收集過程。

試驗(yàn)方案中應(yīng)確定嚴(yán)格的病例納入/排除標(biāo)準(zhǔn)，任何已經(jīng)入選的病例再被排除出臨床試驗(yàn)都應(yīng)記錄在案并明確說明原因。在試驗(yàn)操作過程中和判定試驗(yàn)結(jié)果時(shí)應(yīng)采用盲法以保證試驗(yàn)結(jié)果的客觀性。

2.質(zhì)量控制

臨床試驗(yàn)開始前，建議進(jìn)行臨床試驗(yàn)的預(yù)試驗(yàn)，以熟悉并掌握相關(guān)試驗(yàn)方法的操作、儀器、技術(shù)性能等，最大限度控制試驗(yàn)誤差。整個(gè)試驗(yàn)過程都應(yīng)處于有效的質(zhì)量控制下，最大限度保證試驗(yàn)數(shù)據(jù)的準(zhǔn)確性及精密度。

3.臨床試驗(yàn)報(bào)告

臨床試驗(yàn)報(bào)告應(yīng)該對(duì)試驗(yàn)的整體設(shè)計(jì)及各個(gè)關(guān)鍵點(diǎn)給予清晰、完整的闡述，應(yīng)該對(duì)整個(gè)臨床試驗(yàn)實(shí)施過程、結(jié)果分析、結(jié)論等進(jìn)行條理分明的描述，并應(yīng)包括必要的基礎(chǔ)數(shù)據(jù)和統(tǒng)計(jì)分析方法，最后得出臨床試驗(yàn)結(jié)論。

三、參考文獻(xiàn)

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