附件：人類免疫缺陷病毒抗原抗體檢測試劑臨床前注冊審查指導(dǎo)原則（2022年第36號(hào)）.doc

人類免疫缺陷病毒抗原抗體檢測試劑臨床前注冊審查指導(dǎo)原則

本指導(dǎo)原則旨在指導(dǎo)注冊申請人對人類免疫缺陷病毒抗原抗體檢測試劑性能評價(jià)研究注冊申報(bào)資料的準(zhǔn)備及撰寫，同時(shí)也為技術(shù)審評部門對注冊申報(bào)資料的技術(shù)審評提供參考。

本指導(dǎo)原則是對人類免疫缺陷病毒抗原抗體檢測試劑的一般要求，申請人應(yīng)依據(jù)產(chǎn)品的具體特性確定其中內(nèi)容是否適用，若不適用，需具體闡述理由及相應(yīng)的科學(xué)依據(jù)，并依據(jù)產(chǎn)品的具體特性對注冊申報(bào)資料的內(nèi)容進(jìn)行充實(shí)和細(xì)化。

本指導(dǎo)原則是對申請人和審查人員的指導(dǎo)性文件，但不包括注冊審批所涉及的行政事項(xiàng)，亦不作為法規(guī)強(qiáng)制執(zhí)行，如果有能夠滿足相關(guān)法規(guī)要求的其他方法，也可以采用，但需要提供詳細(xì)的研究資料和驗(yàn)證資料，相關(guān)人員應(yīng)在遵循相關(guān)法規(guī)的前提下使用本指導(dǎo)原則。

本指導(dǎo)原則是在現(xiàn)行法規(guī)和標(biāo)準(zhǔn)體系以及當(dāng)前認(rèn)知水平下制定的，隨著法規(guī)和標(biāo)準(zhǔn)的不斷完善，以及科學(xué)技術(shù)的不斷發(fā)展，本指導(dǎo)原則相關(guān)內(nèi)容也將適時(shí)進(jìn)行調(diào)整。

一、適用范圍

艾滋病，即獲得性免疫缺陷綜合征（acquired immunodeficiency syndrome，AIDS），其病原體為人類免疫缺陷病毒（human immunodeficiency virus，HIV），亦稱艾滋病病毒，屬于反轉(zhuǎn)錄病毒科慢病毒屬。

從全球流行情況來看，HIV-1流行率最高，尤其是HIV-1的M組是全球艾滋病的主要致病原。 HIV-2型的感染人群主要分布在非洲西部國家，其他國家地區(qū)也偶有報(bào)道。

HIV的實(shí)驗(yàn)室檢測主要包括HIV抗原抗體檢測、HIV核酸檢測、CD4+T淋巴細(xì)胞計(jì)數(shù)、HIV耐藥檢測等。其中HIV抗體檢測包括篩查試驗(yàn)和補(bǔ)充試驗(yàn)。

本指導(dǎo)原則適用于采用免疫層析法、化學(xué)發(fā)光法、時(shí)間分辨免疫熒光法等免疫學(xué)方法，體外定性檢測人血清、血漿、全血、口腔黏膜滲出液、尿液等的人類免疫缺陷病毒抗體檢測試劑及抗原抗體聯(lián)合檢測試劑的性能評價(jià)部分。結(jié)合臨床和其他實(shí)驗(yàn)室指標(biāo)，可用于人類免疫缺陷病毒感染的輔助診斷。對基于其他方法學(xué)或檢測靶標(biāo)的試劑、自測類檢測試劑，可能部分要求不完全適用或本文所述內(nèi)容不夠全面，申請人可以參照本指導(dǎo)原則，根據(jù)產(chǎn)品特性對適用部分進(jìn)行評價(jià)或補(bǔ)充其他的評價(jià)資料進(jìn)行相應(yīng)驗(yàn)證。對于該類產(chǎn)品的臨床研究資料參照《人類免疫缺陷病毒檢測試劑臨床研究注冊技術(shù)審查指導(dǎo)原則》。

本指導(dǎo)原則不適用于國家法定血源篩查用HIV檢測試劑。

二、注冊審查要點(diǎn)

（一）監(jiān)管信息

1. 產(chǎn)品名稱及分類編碼

產(chǎn)品名稱應(yīng)符合《體外診斷試劑注冊與備案管理辦法》（國家市場監(jiān)督管理總局令第48號(hào)）及相關(guān)法規(guī)的要求，如人類免疫缺陷病毒抗體檢測試劑（化學(xué)發(fā)光法）。根據(jù)《體外診斷試劑分類規(guī)則》，該產(chǎn)品按照第三類體外診斷試劑管理，分類編碼為6840。

2. 其他信息還包括產(chǎn)品列表、關(guān)聯(lián)文件、申報(bào)前與監(jiān)管機(jī)構(gòu)的聯(lián)系情況和溝通記錄以及符合性聲明等文件。

（二）綜述資料

綜述資料主要包括產(chǎn)品描述、預(yù)期用途、申報(bào)產(chǎn)品上市歷史等內(nèi)容。產(chǎn)品描述中應(yīng)說明產(chǎn)品所采用的技術(shù)原理。同類產(chǎn)品上市情況介紹部分應(yīng)著重從方法學(xué)、檢測原理、特異性抗原抗體等主要組成成分、樣本類型等方面寫明擬申報(bào)產(chǎn)品與目前市場上已獲批準(zhǔn)的同類產(chǎn)品之間的主要區(qū)別。

（三）非臨床資料

1. 產(chǎn)品技術(shù)要求及檢驗(yàn)報(bào)告

申請人應(yīng)當(dāng)在原材料質(zhì)量和生產(chǎn)工藝穩(wěn)定的前提下，根據(jù)產(chǎn)品研制、前期評價(jià)等結(jié)果，依據(jù)國家標(biāo)準(zhǔn)、行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)及有關(guān)文獻(xiàn)資料，按照《醫(yī)療器械產(chǎn)品技術(shù)要求編寫指導(dǎo)原則》（2022年第8號(hào)）的要求編寫。該類產(chǎn)品作為第三類體外診斷試劑，應(yīng)當(dāng)以附錄形式明確主要原材料及生產(chǎn)工藝要求。

如有適用的國家標(biāo)準(zhǔn)、行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)，產(chǎn)品技術(shù)要求的相關(guān)要求應(yīng)不低于相應(yīng)的要求。如該項(xiàng)目已有國家標(biāo)準(zhǔn)品，技術(shù)要求中應(yīng)體現(xiàn)國家標(biāo)準(zhǔn)品的相關(guān)要求，并使用國家標(biāo)準(zhǔn)品對三批產(chǎn)品進(jìn)行檢驗(yàn)。

人類免疫缺陷病毒抗原抗體檢測試劑的產(chǎn)品性能指標(biāo)應(yīng)主要包括：物理性狀、陽性參考品符合率、陰性參考品符合率、重復(fù)性、最低檢測限等。

2. 分析性能研究

申請人應(yīng)提交在符合質(zhì)量管理體系的生產(chǎn)環(huán)境下生產(chǎn)的試劑進(jìn)行的所有性能評估資料，包括具體研究方法、實(shí)驗(yàn)方案、實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)、統(tǒng)計(jì)分析等詳細(xì)資料。有關(guān)分析性能評估的背景信息也應(yīng)在申報(bào)資料中進(jìn)行描述，包括實(shí)驗(yàn)地點(diǎn)，采用的試劑名稱、規(guī)格和批號(hào)，儀器名稱和型號(hào)，樣本類型和來源等。分析性能評估的實(shí)驗(yàn)方法可以參考國際或國內(nèi)有關(guān)體外診斷試劑性能評估的指導(dǎo)原則進(jìn)行，建議著重對以下分析性能進(jìn)行研究。人類免疫缺陷病毒抗原和抗體的性能應(yīng)分別研究。不同性能評估試驗(yàn)建議采用不同的臨床樣本。

2.1樣本穩(wěn)定性

一般包括樣本各種實(shí)際運(yùn)輸及儲(chǔ)存（常溫、冷藏和冷凍）條件下的保存期限驗(yàn)證，以確認(rèn)樣本的保存條件及保存時(shí)間?？梢栽诤侠淼臏囟确秶鷥?nèi)，每間隔一定的時(shí)間段即對儲(chǔ)存樣本進(jìn)行驗(yàn)證，從而確認(rèn)不同類型樣本的穩(wěn)定性?？衫鋬霰４娴臉颖具€應(yīng)對凍融次數(shù)進(jìn)行合理驗(yàn)證。

2.2適用的樣本類型

如果試劑適用于多種樣本類型，應(yīng)分別進(jìn)行性能評估評價(jià)每種樣本類型的適用性。如產(chǎn)品適用于血清和血漿，可采用同源比對驗(yàn)證樣本的可比性和各種抗凝劑的適用性。如產(chǎn)品適用于靜脈全血，建議進(jìn)行最低檢測限和精密度研究，同時(shí)進(jìn)行同源比對試驗(yàn)。

應(yīng)以列表形式說明各項(xiàng)分析性能評估中使用的樣本類型及其來源。

2.3企業(yè)參考品檢驗(yàn)

根據(jù)主要原材料研究資料中的企業(yè)參考品設(shè)置情況，采用三批產(chǎn)品對企業(yè)參考品進(jìn)行檢驗(yàn)并提供詳細(xì)的實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)。

2.4準(zhǔn)確度

抗體檢測試劑：采用同類已上市產(chǎn)品，檢測同一套樣本的方式，比較檢測結(jié)果的差異。樣本應(yīng)選擇一定數(shù)量符合樣本穩(wěn)定性的預(yù)期人群樣本，且包含干擾及交叉樣本，納入孕婦、自身免疫系統(tǒng)疾病、慢性代謝病等人群。樣本應(yīng)注意對常見型別/流行株的覆蓋，建議包含不同來源、不同感染期（急性期、無癥狀感染期、艾滋病期）的臨床樣本。應(yīng)采用合理方法確認(rèn)抗體類型和濃度，提供詳細(xì)的確認(rèn)方法及結(jié)果。

對于難以獲得臨床樣本的1型M組其他亞型、1型O組、2型可通過檢測3套及以上商業(yè)參考盤分析申報(bào)產(chǎn)品檢測結(jié)果與經(jīng)確認(rèn)結(jié)果的符合情況，評價(jià)申報(bào)產(chǎn)品的檢測準(zhǔn)確度。此處所述參考盤指已經(jīng)診斷準(zhǔn)確度標(biāo)準(zhǔn)/其他成熟方法檢測確認(rèn)過的，或有準(zhǔn)確臨床診斷信息的，由多份樣本組成的一套樣本。

抗原檢測試劑：可通過臨床樣本、商業(yè)參考盤、病毒培養(yǎng)物或重組抗原樣本對上述型別進(jìn)行驗(yàn)證。

2.5精密度

HIV-1 M組抗體、HIV-1 O組抗體、HIV-2抗體、抗原應(yīng)分別進(jìn)行精密度研究。應(yīng)選擇臨床樣本、病毒培養(yǎng)物或重組抗原，HIV-1 O組抗體、HIV-2抗體可選擇商業(yè)參考盤進(jìn)行研究。

2.5.1 重復(fù)性、中間精密度和再現(xiàn)性

申請人應(yīng)對精密度指標(biāo)的評價(jià)標(biāo)準(zhǔn)做出合理要求，如變異系數(shù)的范圍或顯色強(qiáng)度等。應(yīng)對可能影響檢測精密度的主要變量進(jìn)行驗(yàn)證，包括不同時(shí)間、地點(diǎn)、操作者、檢測輪次、試劑批次、適用儀器（如適用）等。

設(shè)定合理的精密度評價(jià)周期，例如：為期至少20天的檢測。至少采用3個(gè)水平的臨床樣本進(jìn)行精密度評價(jià)，具體要求如下：

陰性樣本：待測物濃度低于最低檢測限或?yàn)榱銤舛?，陰性檢出率應(yīng)為100%（n≥20）。

臨界陽性樣本：待測物濃度略高于試劑的最低檢測限，陽性檢出率應(yīng)大于95%（n≥20）。

中/強(qiáng)陽性樣本：待測物濃度呈中度到強(qiáng)陽性，陽性檢出率為100%，變異系數(shù)（CV）應(yīng)在合理的可接受范圍內(nèi)（如適用）（n≥20）。

2.5.2 臨界值水平的精密度研究（如適用）

除上述精密度研究外，建議申請人對申報(bào)產(chǎn)品的臨界值進(jìn)行確定，并采用該濃度/水平樣本進(jìn)行精密度研究。

首先建立C50濃度，并通過對該濃度水平樣本進(jìn)行多次重復(fù)檢測，以對C50濃度進(jìn)行確認(rèn)。而后以各濃度水平樣本進(jìn)行多次重復(fù)檢測的方式，判斷某一特定可接受范圍。

申請人可結(jié)合產(chǎn)品的特點(diǎn)，設(shè)置合理的（單側(cè)或雙側(cè)）置信度水平，采用合理的統(tǒng)計(jì)方法對數(shù)據(jù)進(jìn)行分析。推薦對C50±20%兩個(gè)濃度水平分別重復(fù)進(jìn)行40次檢測，當(dāng)+20%濃度水平全部為陽性，-20%濃度水平全部為陰性時(shí)，得出-20%到+ 20%濃度范圍包含C5～C95區(qū)間的置信度＞80%。

2.6包容性

抗體檢測試劑：應(yīng)選擇來源于不同時(shí)間、不同地域的多份臨床確診且經(jīng)合理方法確定人類免疫缺陷病毒抗體陽性的患者樣本或商業(yè)參考盤進(jìn)行檢測，建議覆蓋1型M組（包括B/B'型、 CRF 07_BC重組型、CRF 08_BC重組型、CRF 01_AE重組型、CRF 55_01B在內(nèi)的至少10種亞型或重組型）、1型O組、2型。

抗原檢測試劑：應(yīng)選擇來源于不同時(shí)間、不同地域的多份臨床確診且經(jīng)合理方法確定人類免疫缺陷病毒抗原陽性的患者樣本/病毒培養(yǎng)物或商業(yè)參考盤進(jìn)行包容性評價(jià)。包容性評價(jià)檢測結(jié)果應(yīng)與預(yù)期結(jié)果相符。驗(yàn)證用樣本的濃度水平應(yīng)接近檢測限濃度，可采用臨床陰性樣本進(jìn)行稀釋。

2.7最低檢測限

抗體檢測試劑：至少包括1型M組（B/B'型、BC重組型（包括CRF 07_BC重組型和CRF 08_BC重組型）、AE重組型（CRF 01_AE重組型））、1型O組、2型。建議采用已明確人類免疫缺陷病毒抗體滴度的臨床陽性樣本，其中1型O組、2型可選用商業(yè)參考盤。一般情況下應(yīng)采用陰性樣本系列稀釋，對于口腔黏膜滲出液和尿液，可采用模擬基質(zhì)系列稀釋，稀釋后進(jìn)行最低檢測限的建立和驗(yàn)證。應(yīng)采用合理方法確認(rèn)抗體類型和滴度，提供詳細(xì)的確認(rèn)方法及結(jié)果。

抗原檢測試劑：建議采用已明確人類免疫缺陷病毒抗原濃度的臨床陽性樣本/病毒培養(yǎng)液/標(biāo)準(zhǔn)品/商業(yè)參考盤或重組抗原，驗(yàn)證型別與抗體檢測試劑相同。采用陰性樣本或基質(zhì)進(jìn)行系列稀釋，進(jìn)行最低檢測限的建立和驗(yàn)證。應(yīng)采用合理方法確認(rèn)抗原類型和濃度，提供詳細(xì)的確認(rèn)方法及結(jié)果。最低檢出限建議不低于相關(guān)標(biāo)準(zhǔn)要求。

2.7.1最低檢測限確定

每個(gè)型別選取至少3份樣本，系列稀釋獲得多個(gè)濃度梯度，每個(gè)濃度重復(fù)檢測不少于3次，以100%可檢出的最低濃度水平作為預(yù)設(shè)檢測限。在此濃度附近制備若干濃度梯度樣品，每個(gè)濃度至少重復(fù)檢測20次，將具有95%陽性檢出率的最低濃度作為最低檢測限。

2.7.2最低檢測限驗(yàn)證

選擇與2.7.1不同的3份樣本，采用陰性基質(zhì)稀釋到最低檢測限濃度水平進(jìn)行驗(yàn)證，應(yīng)達(dá)到95%陽性檢出率。

2.8分析特異性

2.8.1交叉反應(yīng)

用于人類免疫缺陷病毒交叉反應(yīng)驗(yàn)證的病原體種類主要考慮以下幾方面：抗原結(jié)構(gòu)具有同源性、易引起相同或相似的臨床癥狀、采樣部位正常寄生或易并發(fā)的其他微生物。

如果試劑原料采用基因重組抗原，則還需考慮對重組基因?qū)胛⑸锾禺愋钥贵w的交叉反應(yīng)評價(jià)。例如采用大腸埃希菌作為宿主菌進(jìn)行重組抗原的表達(dá)，建議考慮大腸埃希菌抗體陽性樣本可能產(chǎn)生的交叉反應(yīng)。

交叉反應(yīng)物的抗原抗體應(yīng)分別進(jìn)行驗(yàn)證，建議在病原體的醫(yī)學(xué)相關(guān)水平進(jìn)行交叉反應(yīng)的驗(yàn)證。通常病毒最低濃度為105PFU/mL，細(xì)菌或者真菌的最低濃度為106CFU/mL，提供所有用于交叉反應(yīng)驗(yàn)證的病毒/樣本的來源、種屬/型別、陰陽性鑒定和濃度/滴度確認(rèn)等試驗(yàn)資料。

抗體試劑建議進(jìn)行的交叉反應(yīng)病原體：Ⅰ/Ⅱ型人類嗜T細(xì)胞病毒、梅毒螺旋體、乙型肝炎病毒、丙型肝炎病毒、巨細(xì)胞病毒、EB病毒、結(jié)核分枝桿菌、Ⅰ/Ⅱ型單純皰疹病毒、水痘帶狀皰疹病毒、馬爾內(nèi)菲青霉菌、人乳頭瘤病毒、人細(xì)小病毒B19。

抗原試劑建議進(jìn)行的交叉反應(yīng)病原體：甲型流感病毒、乙型肝炎病毒、巨細(xì)胞病毒、EB病毒、結(jié)核分枝桿菌、Ⅰ/Ⅱ型單純皰疹病毒、水痘帶狀皰疹病毒、念珠菌、人乳頭瘤病毒、人細(xì)小病毒B19、風(fēng)疹病毒、馬爾內(nèi)菲青霉菌、支原體、隱球菌。

2.8.2干擾試驗(yàn)

應(yīng)根據(jù)所采集樣本類型，選擇適用的干擾物質(zhì)進(jìn)行研究。建議申請人在每種干擾物質(zhì)的潛在最大濃度（“最差條件”）下，采用待測抗體/抗原為弱陽性和陰性水平的多例樣本進(jìn)行試驗(yàn)，應(yīng)至少包括下列可能的干擾物質(zhì)。

內(nèi)源性干擾物質(zhì)：

血液：血紅蛋白、膽紅素、血脂、類風(fēng)濕因子、其他自身免疫性抗體（如抗核抗體、系統(tǒng)性紅斑狼瘡），異嗜性抗體（如HAMA）、總IgG、總IgM、紅細(xì)胞壓積（全血樣本適用）。

口腔黏膜滲出液：唾液（蛋白）、漱口水、薄荷糖、食物殘?jiān)?、牙膏?/p>

尿液：尿潛血、總蛋白、尿膽紅素、尿液白細(xì)胞、紅細(xì)胞、尿酮體、尿膽原、亞硝酸鹽、葡萄糖、細(xì)菌、真菌、尿比重和pH異常樣本

外源性干擾物質(zhì)：

常見治療性藥物：主要包括抗反轉(zhuǎn)錄病毒藥物（核苷類反轉(zhuǎn)錄酶抑制劑、非核苷類反轉(zhuǎn)錄酶抑制劑、蛋白酶抑制劑、整合酶抑制劑、融合抑制劑）、抗病毒藥物（鳥苷類、阿昔洛韋、伐昔洛韋、奧司他韋等）、抗生素、抗炎鎮(zhèn)痛藥（阿司匹林、洛索洛芬、布洛芬等）、抗結(jié)核藥（利福平、異煙肼等）及其他針對機(jī)會(huì)性感染疾病的治療藥物、癥狀相關(guān)其他經(jīng)驗(yàn)性藥物（如激素類藥物）。

其他外源性干擾物：乙醇、咖啡因、常見及新型毒品（選擇性驗(yàn)證）。

2.9高劑量鉤狀效應(yīng)

HIV-1抗體、HIV-2抗體、抗原應(yīng)分別進(jìn)行鉤狀效應(yīng)研究，須采用多份高滴度臨床樣本或重組抗原進(jìn)行梯度稀釋后由低濃度至高濃度分別檢測，每個(gè)梯度的稀釋液重復(fù)3～5次，對鉤狀效應(yīng)進(jìn)行合理的驗(yàn)證。

2.10其他需注意問題

對于使用儀器進(jìn)行結(jié)果判讀的產(chǎn)品，應(yīng)提供產(chǎn)品說明書【適用機(jī)型】項(xiàng)中所有型號(hào)儀器的性能評估資料。

2.11反應(yīng)體系

反應(yīng)體系研究資料包括樣本的制備方式（采集和處理）、樣本要求、樣本用量、試劑用量、反應(yīng)條件、質(zhì)控方法、結(jié)果判讀方式等。

反應(yīng)條件確定：申請人應(yīng)考慮反應(yīng)時(shí)間、判讀時(shí)間、反應(yīng)溫度、洗滌液體積和洗滌次數(shù)（如涉及）等條件對產(chǎn)品性能的影響，通過實(shí)驗(yàn)確定上述條件的最佳組合。

反應(yīng)體系中樣品加樣方式及加樣量確定：通過實(shí)驗(yàn)確定最佳的加樣方式及加樣量。如樣本需采取稀釋或其他必要的方法進(jìn)行處理后方可用于最終檢測，申請人還應(yīng)對樣本稀釋液及其用量、其他必要的處理方法、采樣時(shí)間點(diǎn)（用藥前后、刷牙前后、餐前餐后、尿液采集時(shí)間/尿段）、專用采樣工具等進(jìn)行研究。

3. 穩(wěn)定性研究

主要包括實(shí)時(shí)穩(wěn)定性（有效期）、開瓶（開封）穩(wěn)定性、凍融穩(wěn)定性（如涉及）、機(jī)載穩(wěn)定性（如涉及）、運(yùn)輸穩(wěn)定性等研究。如果產(chǎn)品配套校準(zhǔn)品，還應(yīng)對校準(zhǔn)頻率進(jìn)行研究。申請人可根據(jù)實(shí)際需要選擇合理的穩(wěn)定性研究方案。穩(wěn)定性研究資料應(yīng)包括研究方法的確定依據(jù)、具體的實(shí)施方案、接受標(biāo)準(zhǔn)、詳細(xì)的研究數(shù)據(jù)以及結(jié)論。對于實(shí)時(shí)穩(wěn)定性研究，應(yīng)提供至少三批樣品在實(shí)際儲(chǔ)存條件下保存至成品有效期后的研究資料。

4. 陽性判斷值研究

提交對申報(bào)試劑陰性/陽性結(jié)果判斷的陽性判斷值（cut-off）研究資料，包括具體的試驗(yàn)方案、人群及樣本選擇、評價(jià)標(biāo)準(zhǔn)、統(tǒng)計(jì)學(xué)分析和研究數(shù)據(jù)等。建立陽性判斷值的樣本選擇應(yīng)考慮不同的地理區(qū)域、不同的感染階段和生理狀態(tài)等因素的影響，納入陰性、陽性及臨界值附近的樣本。申請人應(yīng)根據(jù)具體情況選擇適當(dāng)?shù)姆椒?，如受試者工作特征曲線（ROC）的分析方式，來確定合理的陽性判斷值。若試驗(yàn)結(jié)果存在灰區(qū)，則應(yīng)明確灰區(qū)建立的基礎(chǔ)。

如產(chǎn)品適用多個(gè)樣本類型，應(yīng)明確不同的樣本類型是否存在差異，如無差異，可采用一個(gè)樣本類型進(jìn)行陽性判斷值確定后，對其他樣本類型進(jìn)行驗(yàn)證。如有差異，應(yīng)分別進(jìn)行陽性判斷值的確定。

5. 其他資料

5.1主要原材料研究資料

此類產(chǎn)品的主要原材料一般包括抗原、抗體、對照品/質(zhì)控品/校準(zhǔn)品和企業(yè)參考品等。如主要原材料為企業(yè)自制，應(yīng)提供其詳細(xì)的制備、鑒定和質(zhì)量控制過程，其制備工藝必須相對穩(wěn)定;如主要原材料源于外購，應(yīng)提供資料包括：選擇該原材料的依據(jù)及對比篩選試驗(yàn)資料、選定的供應(yīng)商名稱，供應(yīng)商提供的原材料檢驗(yàn)報(bào)告（質(zhì)量證書），以及該原材料到貨后的入廠檢驗(yàn)報(bào)告，供應(yīng)商應(yīng)為原材料的生產(chǎn)商，不得隨意更換。申請人應(yīng)對各主要原材料均明確質(zhì)量控制標(biāo)準(zhǔn)。

5.1.1人類免疫缺陷病毒抗原

應(yīng)注重抗原表位的選擇，詳述選擇該抗原的依據(jù)及過程。詳細(xì)描述抗原的名稱，生物學(xué)來源、供應(yīng)商、天然/重組表達(dá)信息，提交抗原制備、純化、鑒定及質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)（外觀、蛋白濃度、純度、分子量、功能性試驗(yàn)等）等詳細(xì)試驗(yàn)資料。

5.1.2人類免疫缺陷病毒抗體

抗體的選擇依據(jù)及過程，提交抗體名稱、生物學(xué)來源、免疫原、克隆號(hào)及質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)（外觀、蛋白濃度、純度、分子量、效價(jià)、功能性試驗(yàn)等）等詳細(xì)試驗(yàn)資料。

5.1.3質(zhì)控線/質(zhì)控品/校準(zhǔn)品

免疫層析方法學(xué)的產(chǎn)品應(yīng)設(shè)置質(zhì)控線，詳述質(zhì)控線相關(guān)原材料（例如羊抗鼠IgG多克隆抗體）的選擇依據(jù)和質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)。

質(zhì)控品應(yīng)至少包含陰性和陽性兩個(gè)水平。陽性質(zhì)控品/校準(zhǔn)品可選擇經(jīng)合理稀釋的臨床陽性樣本/重組抗原/人源化抗體等;陰性質(zhì)控品/校準(zhǔn)品建議選擇臨床陰性樣本或陰性基質(zhì)。提交相關(guān)原料的來源、選擇和陰、陽性確認(rèn)、溯源等相關(guān)研究資料。企業(yè)應(yīng)對質(zhì)控品的檢測結(jié)果做出明確的范圍要求（試驗(yàn)有效性的判斷）。

5.1.4其他主要原材料

除上述主要原材料外，產(chǎn)品中包含的其他主要原輔料，如膠體金、標(biāo)記物（如辣根過氧化物酶等）、發(fā)光底物（如吖啶酯等）、硝酸纖維素膜、微孔板、磁微粒等，均應(yīng)進(jìn)行驗(yàn)證，并提交相關(guān)資料。明確主要原輔料的供應(yīng)商和質(zhì)量控制標(biāo)準(zhǔn)。免疫層析方法學(xué)的產(chǎn)品如適用于全血，應(yīng)介紹血細(xì)胞去除方式及相關(guān)原材料，并驗(yàn)證去除效果。

5.1.5企業(yè)參考品

企業(yè)參考品是保證產(chǎn)品性能穩(wěn)定的重要構(gòu)成之一。應(yīng)提交企業(yè)參考品的原料來源、選擇、制備、陰陽性及濃度/滴度確認(rèn)方法或試劑等相關(guān)驗(yàn)證資料。企業(yè)參考品的基質(zhì)應(yīng)與待測樣本相同，對于口腔黏膜滲出液和尿液，如難以獲得大量待測樣本基質(zhì)或樣本穩(wěn)定性差，可選擇模擬基質(zhì)。企業(yè)參考品的設(shè)置應(yīng)至少包括：陽性參考品、陰性參考品、檢測限參考品和重復(fù)性參考品。

對于同時(shí)檢測抗原和抗體的試劑，企業(yè)參考品需對抗原和抗體分別設(shè)置。

抗體企業(yè)參考品應(yīng)選擇不同來源的臨床樣本，其中O組、2型如難以獲得臨床樣本可選擇商業(yè)參考盤或免疫制備抗體。其中陽性參考品重在評估產(chǎn)品的包容性，并設(shè)置不同滴度水平，應(yīng)覆蓋申報(bào)產(chǎn)品聲稱可檢出的主要亞型，至少包括M組（B/B'型、BC重組型（包括CRF 07_BC重組型和CRF 08_BC重組型）、AE重組型（CRF 01_AE重組型））、O組（如聲稱）、2型（如聲稱）。陰性參考品應(yīng)可評價(jià)產(chǎn)品的特異性，建議包括含有常見內(nèi)源性干擾物質(zhì)（如適用）溶血、脂血、黃疸、類風(fēng)濕因子、唾液、漱口水、尿潛血、總蛋白、尿膽紅素、其他病原體抗體（如梅毒螺旋體、乙型肝炎病毒、丙型肝炎病毒、結(jié)核桿菌）等可能的干擾和交叉樣本。檢測限參考品應(yīng)包含最低檢測限水平，驗(yàn)證型別與陽性參考品相同。重復(fù)性參考品可設(shè)置1型、2型（如聲稱）各至少兩個(gè)水平的陽性樣本，包括最低檢測限附近濃度。

抗原企業(yè)參考品可選擇不同來源的臨床樣本、病毒培養(yǎng)物、商業(yè)參考盤或重組抗原等。其中陽性參考品重在評估產(chǎn)品的包容性，并設(shè)置不同滴度水平，驗(yàn)證型別應(yīng)與抗體陽性參考品相同。陰性參考品應(yīng)可評價(jià)產(chǎn)品的特異性，建議包括含有常見內(nèi)源性干擾物質(zhì)（如適用）溶血、脂血、黃疸、類風(fēng)濕因子、唾液、漱口水、尿潛血、總蛋白、尿膽紅素、其他病原體（如乙型肝炎病毒、巨細(xì)胞病毒）等可能的干擾和交叉樣本。檢測限參考品應(yīng)包含最低檢測限水平，驗(yàn)證型別應(yīng)與陽性參考品相同。重復(fù)性參考品可設(shè)置1型、2型（如聲稱）各至少兩個(gè)水平樣本，包括最低檢測限附近濃度。

5.2生產(chǎn)工藝研究資料

5.2.1產(chǎn)品基本反應(yīng)原理介紹。

5.2.2主要生產(chǎn)工藝介紹，可用流程圖方式表示，并簡要說明主要生產(chǎn)工藝的確定依據(jù)。

5.2.3包被/標(biāo)記工藝研究，申請人應(yīng)考慮如包被/標(biāo)記液量、濃度、時(shí)間、條件等指標(biāo)對產(chǎn)品性能的影響，通過實(shí)驗(yàn)確定上述指標(biāo)的最佳組合。

5.2.4顯色系統(tǒng)、酶作用底物等的介紹以及最適條件研究。

5.2.5詳細(xì)描述為消除干擾影響、降低假陽性率等采取的特殊工藝處理（如表面活性劑的選擇），提交相應(yīng)研究資料。

（四）產(chǎn)品說明書

產(chǎn)品說明書是體外診斷試劑注冊申報(bào)最重要的文件之一。產(chǎn)品說明書的格式應(yīng)符合《體外診斷試劑說明書編寫指導(dǎo)原則》（原國家食品藥品監(jiān)督管理總局通告2014年第17號(hào)）的要求，進(jìn)口體外診斷試劑的中文說明書除格式要求外，其內(nèi)容應(yīng)盡量保持與原文說明書的一致性，翻譯力求準(zhǔn)確且符合中文表達(dá)習(xí)慣。產(chǎn)品說明書中相關(guān)技術(shù)內(nèi)容均應(yīng)與申請人提交的注冊申報(bào)資料中的相關(guān)研究結(jié)果保持一致，如某些內(nèi)容引用自參考文獻(xiàn)，則應(yīng)以規(guī)范格式對此內(nèi)容進(jìn)行標(biāo)注，并單獨(dú)列明文獻(xiàn)的相關(guān)信息。

結(jié)合《體外診斷試劑說明書編寫指導(dǎo)原則》的要求，人類免疫缺陷病毒抗原抗體檢測試劑說明書編寫應(yīng)重點(diǎn)關(guān)注以下內(nèi)容。

1.【預(yù)期用途】

1.1該產(chǎn)品用于體外定性檢測人血清/血漿/全血……樣本中的人類免疫缺陷病毒（如P24）抗原和（HIV-1/2 M/O組）抗體。

1.2結(jié)合臨床和其他實(shí)驗(yàn)室指標(biāo)，用于人類免疫缺陷病毒感染的輔助診斷。

1.3臨床背景描述：簡單介紹病原體的生物學(xué)特征、流行病學(xué)、潛伏期、易感人群、感染后的臨床表現(xiàn)及相關(guān)疾病等。簡要介紹現(xiàn)有的HIV臨床或?qū)嶒?yàn)室診斷方法。

2.【樣本要求】重點(diǎn)明確以下內(nèi)容：

2.1樣本采集：明確采集時(shí)間、采集順序、采集量等，是否受臨床癥狀、用藥情況等因素的影響。說明采集方法及樣本類型，對于血漿、全血樣本，應(yīng)注明對抗凝劑的要求。

2.2樣本處理及保存：樣本處理方法、保存條件（如冷藏、冷凍等）及不同保存條件下的保存時(shí)限和運(yùn)輸條件等。冷藏、冷凍樣本檢測前是否需要恢復(fù)室溫，冷凍樣本的凍融次數(shù)限制等。如需專用采樣工具應(yīng)進(jìn)行詳細(xì)說明。

3.【檢驗(yàn)方法】

詳細(xì)說明試驗(yàn)操作的各個(gè)步驟：

3.1實(shí)驗(yàn)環(huán)境：實(shí)驗(yàn)室的溫度、濕度要求，檢測試劑及樣本的復(fù)溫要求等。

3.2試劑配制方法，試劑開封后使用方法等。

3.3高濃度樣本稀釋的方法。

3.4試驗(yàn)條件：操作步驟、溫度、時(shí)間、儀器波長等。

3.5質(zhì)量控制：操作步驟，質(zhì)控結(jié)果的要求（試驗(yàn)有效性的判斷），質(zhì)控結(jié)果不符合要求的處理方式。

3.6對于膠體金法檢測試劑可以圖示形式顯示正確的檢驗(yàn)操作方法、程序等。特別注意應(yīng)強(qiáng)調(diào)操作溫度及濕度條件、讀取結(jié)果的時(shí)間。

3.7特別說明檢驗(yàn)操作過程中的注意事項(xiàng)。

4.【陽性判斷值】說明陽性判斷值，并簡要說明陽性判斷值確定的試驗(yàn)方法。如陽性判斷值需進(jìn)行計(jì)算確定，詳細(xì)描述具體計(jì)算方法。

5.【檢驗(yàn)結(jié)果的解釋】

結(jié)合質(zhì)控線/對照品/質(zhì)控品/校準(zhǔn)品以及樣本的檢測結(jié)果，對所有可能出現(xiàn)的結(jié)果組合及相應(yīng)的解釋進(jìn)行詳述。對于膠體金法檢測試劑可采用圖示形式顯示檢測結(jié)果。

對于檢測試劑應(yīng)明確試驗(yàn)無反應(yīng)，報(bào)告為“HIV抗體陰性”。試驗(yàn)有反應(yīng)，必須進(jìn)行復(fù)檢（使用原有試劑雙孔/雙份檢測或使用原有試劑加另一種試劑檢測）：兩次均無反應(yīng)，報(bào)告為“HIV抗體陰性”;兩次均有反應(yīng)，或一個(gè)有反應(yīng)一個(gè)無反應(yīng)，需進(jìn)一步進(jìn)行“補(bǔ)充試驗(yàn)”。

檢驗(yàn)結(jié)果的解釋應(yīng)以陽性判斷值的研究結(jié)論為依據(jù)。如有適用的臨床診療指南，則應(yīng)在此項(xiàng)下引用，相應(yīng)檢驗(yàn)結(jié)果的解釋應(yīng)符合相關(guān)指南的要求。如有灰區(qū)判定，詳細(xì)說明灰區(qū)樣本的處理方法。

6.【檢驗(yàn)方法局限性】

綜合產(chǎn)品的預(yù)期用途、臨床背景、檢測方法及適用范圍等信息，對可能出現(xiàn)的局限性進(jìn)行相關(guān)說明，建議包括以下內(nèi)容：

6.1 本試劑盒的檢測結(jié)果不得作為臨床診治的唯一依據(jù)，對患者的臨床管理應(yīng)結(jié)合其癥狀/體征、病史、其他實(shí)驗(yàn)室檢查及治療反應(yīng)等情況綜合考慮。

6.2不合理的樣本采集、轉(zhuǎn)運(yùn)、處理及不當(dāng)?shù)膶?shí)驗(yàn)操作和實(shí)驗(yàn)環(huán)境均有可能導(dǎo)致假陰性或假陽性結(jié)果。

6.3感染初期或艾滋病晚期，抗體可能未產(chǎn)生或者產(chǎn)生水平低于產(chǎn)品最低檢測限，而產(chǎn)生陰性結(jié)果。檢測陰性不能排除急性感染，對于可疑的樣本建議進(jìn)行病原學(xué)檢測，或至少間隔7天再次檢測。

6.4評價(jià)血清學(xué)檢測結(jié)果時(shí)需要結(jié)合患者的臨床病程、基礎(chǔ)狀況以及年齡等因素綜合考慮，如：免疫功能低下、缺陷的人群、產(chǎn)生抗體能力較低的嬰幼兒，可能不產(chǎn)生或產(chǎn)生低滴度的抗體，其血清學(xué)抗體檢測的參考價(jià)值有限。

6.5如疑似窗口期感染，建議依據(jù)全國艾滋病檢測技術(shù)規(guī)范進(jìn)行后續(xù)驗(yàn)證。。

6.6 HIV-1 p24抗原試驗(yàn)有反應(yīng)的樣本，必須經(jīng)過確證以后才能判斷陽性或陰性。

6.7 HIV-1 p24抗原陽性僅作為HIV感染的輔助診斷依據(jù);HIV-1 p24抗原陰性結(jié)果不能排除HIV感染。

7.【產(chǎn)品性能指標(biāo)】

根據(jù)產(chǎn)品性能評估資料，詳述以下性能指標(biāo)：企業(yè)參考品符合率、最低檢測限、包容性、精密度、分析特異性（交叉反應(yīng)和干擾試驗(yàn)）、鉤狀（HOOK）效應(yīng)。介紹所用樣本背景信息、數(shù)量、濃度，評價(jià)方法及檢測結(jié)果。

8.【注意事項(xiàng)】

應(yīng)至少包括以下內(nèi)容：

8.1有關(guān)試劑盒內(nèi)人源組分（如有）生物安全性的警告。如：試劑盒內(nèi)對照品（質(zhì)控品）或其他可能含有人源物質(zhì)的組分，雖已經(jīng)通過了乙型肝炎病毒表面抗原（HBs-Ag）、丙型肝炎病毒抗體（HCV-Ab）等項(xiàng)目的檢測，結(jié)果為陰性，但截至目前，沒有任何一項(xiàng)檢測可以確保絕對安全，故仍應(yīng)將這些組分作為潛在傳染源對待。

8.2全血、血漿的運(yùn)送應(yīng)符合生物安全要求，參照《可感染人類的高致病性病原微生物菌（毒）種或樣本運(yùn)輸管理規(guī)定》。

三、參考文獻(xiàn)

[1]體外診斷試劑注冊與備案管理辦法（國家市場監(jiān)督管理總局令第48號(hào)）[Z].

[2]關(guān)于公布體外診斷試劑注冊申報(bào)資料要求和批準(zhǔn)證明文件格式的公告（國家藥品監(jiān)督管理局公告2021年第122號(hào)）[Z].

[3]體外診斷試劑說明書編寫指導(dǎo)原則（原國家食品藥品監(jiān)督管理總局公告2014年第17號(hào)）[Z].

[4]WS -293-2019,艾滋病和艾滋病病毒感染診斷標(biāo)準(zhǔn) [S].

[5]中華醫(yī)學(xué)會(huì)感染病學(xué)分會(huì)艾滋病丙型肝炎學(xué)組中國疾病預(yù)防控制中心,中國艾滋病診療指南[J],中國艾滋病性病,2021.

[6]中國疾病預(yù)防控制中心.全國艾滋病檢測技術(shù)規(guī)范[Z].2020.